lIAA16沉默转基因植株的获得及功能初探.PDF

江苏农业科学　２０１７年第４５卷第５期 — ２９— 刘斯超，许　涛，董秀芬，等．番茄ＳｌＩＡＡ１６沉默转基因植株的获得及功能初探［Ｊ］．江苏农业科学，２０１７，４５（５）：２９－３３． ｄｏｉ：１０．１５８８９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００２－１３０２．２０１７．０５．００７ 番茄ＳｌＩＡＡ１６沉默转基因植株的获得及功能初探 １，２ １ １ １ ２ ２ 刘斯超 ，许　涛 ，董秀芬 ，付　欣 ，郑鹏靖 ，李　兵 （１．沈阳农业大学园艺学院，辽宁沈阳１１０１６１；２．河北省承德市蔬菜技术推广站，河北承德０６７０００） 　　摘要：Ａｕｘ／ＩＡＡ（ａｕｘｉｎ／ｉｎｄｏｌｅ－３－ａｃｅｔｉｃａｃｉｄ）作为生长素早期响应因子，其蛋白产物能够特异性地结合生长素响 应因子（ａｕｘｉｎｒｅｓｐｏｎｓｅｆａｃｔｏｒ，ＡＲＦ），从而调控生长素响应基因的表达，在整个植物生长素信号转导过程中发挥着重要 的作用，进而影响植物的生长发育。本研究通过构建沉默载体，在高效遗传转化体系下获得转基因植株，发现利用 Ｇａｔｅｗａｙ克隆技术将番茄生长素早期响应基因ＳｌＩＡＡ１６Ｄｏｍａｉｎ 区部分序列连入具有正反２个ａｔｔｒ区域并连接１个内 Ⅱ 含子的ｐＢ７ＧＷＩＷＧ２（ ）载体，可在植株体内形成发卡结构导致植物基因沉默，成功构建基因沉默表达载体名为 Ⅰ ＳｌＩＡＡＲＮＡｉ；此外，抗生素喷施和ＰＣＲ扩增以及实时定量检测进一步鉴定，共获得１２棵ＳｌＩＡＡ１６ＲＮＡｉ阳性植株。本研 究结果将为进一步明确ＳｌＩＡＡ的生物学功能和阐明生长素的作用机理提供参考。 　　关键词：番茄；生长素；ＳｌＩＡＡ１６；载体构建；基因表达 　　中图分类号：Ｑ７８５；Ｑ７８６　　文献标志码：Ａ　　文章编号：１００２－１３０２（２０１７）０５－００２９－０４ 　　生长素（ＩＡＡ）在植物的生长和发育中起着重要的作用， 端优势，降低对生长素的响应能力，促使黄化苗顶端弧度的增 ［１９］ 它不仅可以作用于细胞膜引起细胞的快速反应，而且还能够 加等，这表明ＳｌＩＡＡ３参与了生长素与乙烯间的ｃｒｏｓｓｔａｌｋ 。 ［１－２］ 在分子水平上特异性地调控基因表达 。Ａｕｘ／ＩＡＡ作为生 张俊红研究发现，ＳｌＩＡＡ４、ＳｌＩＡＡ１４基因影响番茄主根的生成， 长素信号反应中的关键调控因子，已经在拟南芥、番茄等模式 ＳｌＩＡＡ４基因的调控具有多效性，在转基因番茄中不仅发现了 ［３］ 植物中进行了广泛的研究 。Ａｕｘ／ＩＡＡ基因属于多基因家 叶片融合的现象，还发现了花与果实等多器官融合的表 ［２０］ 族，目前在拟南芥中已发现有２９个Ａｕｘ／ＩＡＡ家族基因，水稻 型 。Ｂａｓｓａ等研究发现番茄ＳｌＩＡＡ２７可以引起单性结实，且 ［２１］ 和玉米中均有３１个成员，黄瓜中有２８个，棉花上有 １０个，马 果实形状为尖果型 。Ｘｕ等研究发现ＳｌＩＡＡ１５上调表达影 ［２２］ 铃薯中有２７个，苹果中有４０个，草莓、高粱和番茄中有２６个 响叶片的气孔发育及叶片的形状 。 Ａｕｘ