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附件六 苏州科技学院 毕业论文开题报告 论文题目 无油工艺提取甾醇药物中间物4-AD 院 系 化学生物与材料工程学院 专 业 生物工程 学生姓名 杜巧巧 学 号 1120120134 指导教师 李良智 2015年 3 月 25 日 1．研究的背景、目的及意义 在大自然中存在着化合物，甾体化合物的甾体激素类药物临床上不可缺少的，常见的。雄-烯-3,17-2酮简称雄烯二酮（AD）则是甾体激素类药物中间体目前在国内外对甾体药物的需求量是巨大的，因而，我们所要的雄烯二酮就具有广阔的市场前景。 2．主要研究内容和预期目标 一、了解甾醇药物的物理化学性质； 二、研究有油工艺是如何能溶解甾醇药物的； 三、寻找能够促进甾醇溶于水的促溶剂，增加甾醇在水中的溶解度，从而能够形成不用加油就能使甾醇、水、分枝杆菌很好的混匀接触； 四、了解其中分枝杆菌新城代谢所进行的一系列化学反应； 五、通过有油工艺与无油工艺的最终发酵产物4AD的得率，来判断该所进行的无油工 艺是否相对于有油工艺来说经济效益更好，生产效率更高，4AD产量更高； 预期目标：能够探索出更加经济有效的促溶剂，使得甾醇能更好地溶解于水中，以免去增加油这一溶剂的麻烦，从而为提取药物中间物4-AD提供更方便的生产工艺。 3．拟采用的研究方法、步骤 分枝杆菌的活化、扩培； 制备分枝杆菌种子培养基，将分枝杆菌接入种子培养基中于30℃、200r/min下摇床培养； 配制50ml含油以及含某促溶剂的发酵培养基中，接入25ml分枝杆菌种子培养基于30℃、200r/min条件下摇床培养88h后，取20ml发酵液用乙酸乙酯以1:1比例萃取发酵液两次； 将萃取后得到的样品进行薄层层析（TLC）点样分析，于紫外灯下初步判断转化水平； 将上一步骤处理后的TLC薄板用2O％稀硫酸均匀喷淋，用干纸巾擦拭薄板背面残液，之后将其置于110℃烘箱内烘烤15 min左右，使底物和各组分产物、副产物充分显色，并进行定性分析； 将上述发酵液中的油用某促溶剂替代，并按上述步骤进行同样的实验操作，对所得到的实验结果与之前进行对比分析，判断此促溶剂能否替代到油使AD的产量得以提高。 4．主要参考文献 [1]杨英，姜绍通，操丽丽等.双液相系统中生物降解植物甾醇制备雄烯二酮工艺[J].农业机械学报， 2008，39（9）：79-86. [2]张裕卿，王东青.植物甾醇微生物转化制备甾体药物中间体的研究进展[J].微生物学通报，2006， 33(2)：142-146. [3]杨英.菜籽甾醇转化制备雄烯二酮高产菌株的诱变育种[J]食品科学，2009,30(5):145-148. [4]张怀成,王风清，马昱澍等.分枝杆菌转化甾醇产9-羟基雄甾烯酮促进剂的筛选[J].化学与生物工程,2013,30(12):55-58. [5]欧水平,王森,张海燕等.中药液体制剂的关键技术-难溶性成分的增溶方法[J].中国药师,2009, 12(2):239-241. [6]王风清.利用分枝杆菌降解植物甾醇生产雄甾烯酮的研究[D].天津,天津科技大学,2003． [7]陈坚,李寅.发酵过程优化原理与实践[M]．北京：化学工业出版社，2002．3． [8]李金亮,冯霞,刘斌等.聚乙二醇支载水溶性紫杉醇衍生物的合成[J].天津大学学报,2003 ,34 (6):808-801. [9]杜薇.甘草酸对板蓝根冲剂的增溶性[J].中国医院药学杂志,1997,17(7):314一315. [10]崔山风.胡英, 戴义.栅皮素包合物的制备工艺及增溶作用研究[J].中国药师,2006,9(8):701- 702. [11]胡英,陈海靓,梁文权.懈皮素自乳化释药系统的制备和质量评价[J].中国中药杂志,2007,32 (9):805一807. [12] Dogra N, Qazi GN (2001) Steroid biotransformation by differen