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DNA分子杂交法 抗原抗体杂交法 P8 （3、4答案见P8） 返回 （思路小结） 返回 细胞工程 真核细胞与原核细胞 【概念】指应用细胞生物学和分子生物学的原理和方法通过细胞水平和细胞器水平上的操作，按照人的意愿来改造细胞内的遗传物质和获得细胞产品的综合科学技术。 概念 植物细胞工程 植物组织培养 植物体细胞杂交 理论基础 技术手段 动物细胞工程 技术手段 动物细胞培养 动物细胞融合 单克隆抗体 细胞核移植 细胞工程 细胞工程 指应用细胞生物学和分子生物学的原理和方法通过细胞水平和细胞器水平上的操作，按照人的意愿来改造细胞内的遗传物质和获得细胞产品的综合科学技术。 生物类群 相 同 点[统一性] 细 胞 质 细 胞 核 细胞大小 真核细胞 原核细胞 细胞类别 较小 较大 只有拟核，无核膜、核仁和染色体 只有核糖体，无其他复杂细胞器 有真正的细胞核（有核膜、核仁和染色体） 有内质网等复杂细胞器（植物有叶绿体和液泡，动物低等植物有中心体） 细菌、蓝藻等 真菌、植物和动物 原核细胞和真核细胞的比较 都有细胞膜、细胞质和由DNA构成的遗传、代谢的控制中心（真核或拟核） 返回 离体的植物器官、组织或细胞 植物体 根、芽 脱分化 再分化 愈伤组织 脱分化 胚状体 再分化 植物细胞表现出全能性的必要条件是什么？ （离体、一定的营养物质、激素） 影响脱分化和再分化的关键因素是什么？ 植物激素 植物组织培养 培养液成分：水蔗糖、氨基酸、无机盐、维生素 杂种细胞 愈伤组织 杂种植株 植物细胞A 植物细胞B 原生质体A 原生质体B 正在融合的原 生 质 体 去壁（方法？） 人工诱导(方法？) 再生壁 脱分化 再分化 植物体细胞的杂交 植物体细胞杂交优点：克服远缘杂交不亲和的障碍，培育作物新品种。 实验验证？ 动物细胞的培养 胰蛋白酶作用？ 培养瓶要求？ 细胞贴壁？ 接触抑制？ 比较动物细胞培养与植物组织培养的异同（表） 思考 原代培养？ 传代培养？ 不死性？ 培养液成分？ 动物组织 分散成单个细胞 胰蛋白酶 或胶原蛋白酶 组织悬液 培养液 稀 释 细胞贴壁分裂繁殖 接触抑制停止分裂 50代以后 少数细胞获得不死性(癌变) 胰蛋白酶等 分散细胞 分瓶继续培养 原代培养 传代培养 10代以后 细胞分裂减慢停止 动物细胞的培养过程 培养瓶中培养 培养液成分：葡萄糖、氨基酸、无机盐、促生长因子、动物血清。 动物细胞融合 融合的原理？ 融合的过程？ 诱导融合的方法？ 融合的用途？ 比较植物体细胞杂交与动物细胞融合的异同(表) 思考 卵细胞 Ａ母绵羊 Ｂ母绵羊 乳腺 细胞 细胞质 细胞核 细胞核移植 C母绵羊子宫 胚胎移植 融合后的卵细胞 细胞核移植 分娩 妊娠 早期胚胎 分裂 B淋巴细胞 骨髓瘤细胞 细胞融合、筛选 杂交瘤细胞 细胞培养 筛选，继续培养 足够数量的、能产生特定抗体的细胞群 体外培养 注射到小鼠腹腔 单克隆抗体 诱导其融合的方法有哪些？ 两次筛选分别有什么目的？ 本过程利用了哪些原理？ 为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与B细胞融合？ 注射抗原 单克隆抗体的制备 第1次筛选 第2次筛选 单克隆抗体的优点：特异性强、灵敏度高，产量大。 在“单抗”上连接抗癌药物，可制成“生物导弹”，将药物定向带到癌细胞所在部位。 返回 流程 单克隆抗体的制备过程 给小鼠注射特定的抗原蛋白 脾脏中分离到 B淋巴细胞 骨髓瘤细 胞 增殖的骨髓瘤细胞 灭活的病毒诱导 选择培养基筛选 未融合细胞 融 合 的同种细胞 融合的杂种细胞（杂交瘤细胞） 第2次 筛 选 特定抗体检测阳性的杂交瘤细胞 体内培养 或体外培养 单克隆抗体 培养 免疫 特点？ 优点？ 能大量繁殖，又能产生单一抗体 特异性强，灵敏度高，产量大 死亡 返回 典例 【典例】观察图，根据题意回答下列问题： （1）若A是HIV，正在侵入B，则B最可能是 细胞。 （2）若B细胞内部已经侵入了麻风杆菌，正在与A接触， 而且A最终导致B细胞裂解死亡，则A是 细胞。 *（3）若A是环境中的某种物质，正在刺激B（即某种微生物）合成某种酶，以调节该微生物的代谢，则此酶属于 酶。 （4）若A是B分泌的某种免疫球蛋白，则B最初来源是 细胞 （5）若A是B（即微生物）排到外环境中的代谢产物，则A属于 代谢产物。 （6）若A、B是动物细胞正在融合，这项技术最重要的用途 是 ，在这项用途中融合后的细胞称为杂交瘤细胞。 （7）若A是病毒，则可作为基因工程的 ，原因之一是具有标记基因，在动物细胞工程中可用作促进