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* 1、嗜血杆菌的染色与形态特性 染 色: G- 。 大 小:小到中等大小 ,0.4-0.8×1.0-3.0μm 。 形 态:单个、成对分布,两极着色重 ,菌体形态似“哑铃” 。有时形成丝状,表现为多形性。 新分离菌株有时能见到荚膜;无芽胞;无鞭毛。 * * 流感嗜血杆菌 Gram stain of Haemophilus influenzae from sputum * 嗜血杆菌的酶系统不够完善,培养时需要加入X和V两种生长因子。 X因子是指具有生长促进作用的血红蛋白衍生物。 V因子是辅酶I或辅酶II两种脱氢酶的一种。 血液中含有X和V两种生长因子。 需氧或兼性厌氧,鸡嗜血杆菌培养时需要5%的CO2环境。 2、嗜血杆菌的培养特性 * 常用巧克力培养基。 在巧克力琼脂上生长形成圆形、隆起、表面光滑、边缘整齐、灰白色半透明的小菌落 普通琼脂和鲜血琼脂生长不良。 卫星现象:在鲜血琼脂上培养时,如同时有葡萄球菌生长,由于葡萄球菌可合成较多的V因子,因此可出现葡萄球菌周围的嗜血杆菌菌落较大,离葡萄球菌越远则越小。 菌落特点:呈针尖大小的露滴状菌落 菌落光滑、透明、不溶血,边缘整齐。 续: * 副鸡 嗜 血 杆 菌 * * 糖发酵试验: 能发酵:葡、麦、甘、蔗; 不发酵:乳、伯胶糖等。 硝酸盐还原(+)、H2S (-) 、明胶液化(-) 、靛基质(-) 氧化酶和接触酶:因不同菌株而有差异。 3、嗜血杆菌的生化特性 * 4、抗原及分型 荚膜多糖抗原: 多糖和磷壁酸,具有型特异性 菌体结构抗原:脂多糖抗原和外膜蛋白抗原,在种内和属内均有交叉 流感嗜血杆菌根据荚膜抗原分为6个生物型,以Ⅰ~Ⅵ型表示 * 嗜血杆菌的抵抗力不强: 常用消毒剂可杀灭; 一般在60℃条件下10~20分钟即可杀灭; 室温下只能生存2~4天。 5、嗜血杆菌的抵抗力 * 6、嗜血杆菌属的致病力 毒力因子:荚膜、菌毛和内毒素 临床意义: 流感嗜血杆菌:引起各种呼吸道感染及小儿脑膜炎 副流感嗜血杆菌:寄居人的上呼吸道 副猪嗜血杆菌:4个血清型,为猪的下呼吸道的正常菌群,应急状态下,可引起全身感染,比如引起猪多浆病,即在大的体腔、关节、脑脊膜的纤维蛋白性炎症。本菌也常与猪流感病毒联合引起猪流感 副禽嗜血杆菌:引起禽类呼吸道系统疾病,引致鸡鼻炎(可从气管侵入到整个肺部)、打喷嚏及面部水肿,产蛋减少,对雏鸡致病力较强 * (以鸡传染性鼻炎为例) 病原分离鉴定: 镜检 采取脑脊液、血液、分泌液 分离培养 采用鲜血琼脂或巧克力琼脂 V因子需要试验 用灭菌棉拭子蘸取病鸡的眶下窦中的粘液或浆液,在鲜血琼脂上划线,并取保姆菌交叉划线,于蜡烛瓶或CO2培养箱中培养18?24小时,若分离菌在血琼脂平板上生长呈现“卫星现象”,菌落呈露滴状、针尖大小的小菌落,且过氧化物酶试验呈现阴性,则可作出诊断。 由于嗜血杆菌在体外存活时间很短,对该病原菌的分离必须及时。 7、嗜血杆菌的微生物学检查 * 除了传统的分离鉴定及常规的血清学方法外,还建立了更加特异敏感的ELISA方法、DNA探针及PCR诊断技术。 * 制定合适的防疫程序,加强预防力度,可减少传染病的发生。(以传染性鼻炎为例) 接种传染性鼻炎菌苗能有效地预防本病的发生,现在中国和外国都有这类商品性灭活菌苗供应。 在鸡传染性鼻炎的防制上,一般是在6~8周龄时进行第一次菌苗接种,3~4周以后或产蛋前再加强免疫接种一次,可获良好的免疫保护效果。 8、嗜血杆菌的免疫 * 第五节 放线杆菌属Actinobacillus 本属细菌为G-杆菌,两极染色,兼性厌氧。 猪胸膜肺炎放线杆菌 林氏放线杆菌 驹放线杆菌 对家畜有致病性的主要有3种: * 1、形态、染色 G-球杆菌,两极染色,无抗酸性; 三无:无荚膜、无芽胞、无鞭毛。 * 2、培 养 兼性厌氧; 普通琼脂生长不良;常用血清琼脂。 菌落细小、圆形、粘稠; 猪胸膜肺炎放线杆菌——β溶血 林氏放线杆菌——蓝灰色 * 3、致病性 (1)猪胸膜肺炎放线杆菌 特点:高度宿主专一性,临床表现为最急性型、急性型、慢性型,病理变化根据病理长短稍有差异,一般特点是:气管和支气管内有大量血色液体和纤维素,粘膜水肿、出血和增厚;肺脏充血、肿大、出血、水肿和肝变,病程久者有大小不等的坏死灶和脓肿,胸腔积液,胸膜表面覆有纤维素 * 毒力因子:荚膜、LPS、外膜蛋白、细胞毒素 传播方式:通过飞沫或直接接触而传播 微生物学诊断 病死猪肺坏死组织、胸水、鼻及气管渗出物→涂片镜检,是否存在两极浓染小杆菌→接种绵羊血琼脂及巧克力琼脂,置5% CO2 条件下培养→CAMP试验,检测尿酶活性及甘露醇发酵能力 * 预防和控制 净化猪群 注射灭活疫苗 * (2)林氏放线杆菌 致牛、羊
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