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第四章 抗 体 制 药;第一节 概述;;;;;单克隆抗体定义;单克隆抗体的应用;;;第二节 单克隆抗体;;;;;;;;体外免疫法基本方法：;;;;杂交瘤细胞筛选;杂交瘤细胞选择性培养的常规方法是将融合的细胞悬浮于HAT的培养液中，加入到含有饲养细胞的96孔板内，根据情况每2-3天换液一次。换液时吸去1／2 ~ 2／3培养液，加入等量的新鲜培养液。在融合后7天内用HAT培养液，杀死瘤—瘤融合细胞后，第7~14天改用HT培养液，14天以后用普通的RPMI 1640完全培养液，从融合后8~9天就可对所有克隆生长孔的培养液上清进行抗体检测，筛选出产生抗体的阳性克隆。;;;;ELISA用于破伤风毒素抗体的筛选;ELISA的种类：;四、杂交瘤细胞与抗体性状的鉴定
?杂交瘤细胞鉴定：染色体分析。它不仅可作为鉴定的客观指标，还能了解分泌抗体的能力。
?单克隆抗体进行Ig类(IgG, IgM, IgA, IgD, IgE)和亚类鉴定，可用羊或兔抗Ig不同类或亚类的抗体，进行免疫扩散或ELISA鉴定。
?特异性、亲和力、纯度、识别抗原的相对分子量等进行测定。;五、单克隆抗体的大量制备;;;;;第三节 鼠源性单克隆抗体的改造;;一、人-鼠嵌合抗体;二、改形抗体（CDR移植抗体）;;;三、小分子抗体;;; 单链抗体大多在大肠杆菌中表达，有三种形式：
①直接在细胞质中表达；
②与其它菌体融合表达融合蛋白；
③分泌表达具有功能的单链抗体。;通过单链抗体的C末端连接另外单链抗体基因，构建和表达双特异单链抗体，可应用于肿瘤的诊断和治疗。它还可与IL—2、TNF等细胞因子基因连接，使细胞因子能特异性杀伤肿瘤细胞，增强抗肿瘤活性，降低其毒副作用。;四、双功能抗体;;五、抗体融合蛋白;;;;;;多功能抗体--单链抗体多聚体（SCFV多聚体）;第四章 抗体制药思考题（1）
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