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电刺激与骨骼肌收缩活动的关系 病理学与病理生理学教研室 梁俊晖 email：liangjunhui-007@163.com Tel QQ：1276175 实验内容 实验目的 实验原理 实验材料 实验方法 实验方法 实验方法 实验方法 注意事项 注意事项 * 1. 实验目的与原理 2. 实验材料 3. 实验方法 4. 注意事项 探索、求知、明理 Experiment is father of science 掌握：1.不同刺激强度、刺激频率对骨骼肌收缩的影响。 熟悉：1.阈下刺激、阈刺激、阈上刺激、最适刺激的概念和意义。 2.单收缩、不完全强直收缩和完全强 直收缩的概念和意义。 掌握：1.坐骨神经-腓肠肌标本的制作。 熟悉：1.张力生物信号采集与处理系统的使用。 理论 操作 探索、求知、明理 Experiment is father of science 单收缩 强度对收缩的影响 频率对收缩的影响 给肌肉一个短促、有效的刺激，肌肉将发生单收缩一个单收缩要经历潜伏期、收缩期、舒张期。 刚能引起收缩反应的最小刺激强度称为阈强度,该刺激称为阈刺激。蟾蜍的腓肠肌内含有许多条骨骼肌纤维,如果刺激强度低于任何肌纤维的阈值,则无动作电位的产生,无收缩反应；当刺激强度超过阈强度,并在一定范围内增加,则引起越来越多的肌纤维兴奋、收缩；当刺激强度增加到使全部肌纤维兴奋时,此时的复合动作电位幅度达到最大,肌肉收缩亦达最大。 探索、求知、明理 Experiment is father of science 给肌肉一连串有效刺激，肌肉可因刺激频率的不同而呈现不同的收缩形式：如果两个连续刺激的间隔大于肌肉收缩期与舒张期之和，则出现一连串相互分离的单收缩；逐渐增大刺激频率，当后一刺激落在前一刺激的舒张期内,其曲线呈锯齿状，即不完全强直收缩；再继续增大刺激频率，当后一刺激落在前一刺激的收缩期内,锯齿波消失,肌肉处于完全、持续的收缩状态,此时为完全强直收缩。 兴奋性良好的肌肉受到人为施加的有效刺激，会产生动作电位，发生反应，其表现是肌肉收缩。随着刺激强度和刺激频率的不同，肌肉将表现出不同的收缩形式： 探索、求知、明理 Experiment is father of science 实验动物 试剂和药品 装置和器材 青蛙 任氏液 RM6240生物信号采集与处理系统、张力换能器、神经标本屏蔽盒、蛙类手术器械、玻璃分针、锌铜弓、培养皿、铁支架等。 探索、求知、明理 Experiment is father of science 1.标本制备 制备坐骨神经-腓肠肌标本，用任氏液润湿的锌铜弓轻轻接触一下坐骨神经或腓肠肌，检查其兴奋性，若肌肉发生迅速而明显的收缩，则表示标本的兴奋性良好。置于任氏液中浸泡10～15分钟，使标本兴奋性稳定后可用于实验。 探索、求知、明理 Experiment is father of science 2.安装实验装置 将张力换能器用双凹夹固定在铁支架上，将结扎与跟腱的手术线水平连接于张力换能器上，将坐骨神经置于屏蔽盒的刺激电极上。 探索、求知、明理 Experiment is father of science 3.进行实验 启动软件，选取相应的实验项目，调节实验参数。 探索、求知、明理 Experiment is father of science 4.观察项目 ⑴刺激强度对收缩的影响：寻找阈刺激、最适刺激。逐渐增加刺激强度，记录肌肉收缩曲线。 ⑵刺激频率对收缩的影响：把刺激强度固定于最适刺激强度,用最低频率的刺激肌肉，记录肌肉单收缩曲线,然后逐渐增加刺激频率，依次记录出肌肉的不完全强直收缩和完全强直收缩曲线。 ⑶对所记录和储存的实验结果进行剪辑,打印,书写实验报告。 标本制作 ⑴随时用任氏液湿润标本，避免手指、金属器械接触或夹持坐骨神经和腓肠肌； 探索、求知、明理 Experiment is father of science ⑵操作过程中勿污染或过分牵拉神经和肌肉； ⑶神经应游离干净，不带其它组织； ⑷应在股骨干中段将其剪断，便于安装； ⑸剪断脊柱时,要在高位横向剪断,以免剪断坐骨神经分支，给实验操作造成困难。同时沿前正中线剪断脊柱,左右各一个坐骨神经-腓肠肌标本。 实验过程 ⑴注意刺激电极与神经的良好接触； 探索、求知、明理 Experiment is father of science ⑵经常滴加任氏液以防标本干燥； ⑶每次连续刺激一般不要超过3～4s。单刺激或连续刺激后都要让肌肉休息相同长的时间（30～60s）。 *