革兰阴性球菌幻灯片.pptVIP

革兰阴性球菌 概述 奈瑟菌属对人致病的有脑膜炎奈瑟菌(N.gonorrhoeae) 和淋病奈瑟菌（N. meningitidis），其余均为人类呼吸道正常菌群 莫拉菌属中的卡他莫拉菌（M.catarrhalis）是致病菌 目前对卡他莫拉菌的归属尚未定论 一、分类 淋病奈瑟菌、脑膜炎奈瑟菌对人致病 寄生在人体内鼻咽腔的腐生菌 解乳糖奈瑟菌、干燥奈瑟菌、微黄奈瑟菌、粘 液奈瑟菌、浅黄奈瑟菌、灰色奈瑟菌、延长奈 瑟菌、去氮奈瑟菌和多糖奈瑟菌 二、脑膜炎奈瑟菌临床意义 寄居于人的鼻咽腔、口腔粘膜上，通过呼吸道分泌 物或空气微滴核而传播。 流行性脑脊髓膜炎 冬末春初，多为学龄儿童、青少年 感染后多为隐性感染，少数可发展为菌血症或败血症，进而累及脑、脊髓膜，形成化脓性脑膜炎 可出现严重的临床症状如发热、头痛、脑膜刺激 症阳性、甚至休克和DIC等；菌血症和细菌的损 伤作用使约半数患者出现皮下瘀斑 尽管可以在鼻咽部形成带菌状态，但侵袭性的脑膜炎奈瑟菌感染多为新近感染，急性发病，发病时机体内缺乏杀菌抗体。 主要致病物质是内毒素：可引起发热、微循环障碍，严重者可致内毒素休克、血栓、DIC等 依据荚膜多糖的抗原成分可分为：A、B、C、……等13个血清群，我国A群占95.8%，其余为B、C等群。 淋病奈瑟菌临床意义 淋病的病原菌 主要通过性接触直接感染 在分娩时通过产道感染新生儿 临床表现为： 单纯性淋病 盆腔炎口咽部和肛门直肠淋病 淋菌性结膜炎 播散性淋病 致病物质包括菌毛、外膜蛋白、蛋白水解酶、脂多 糖和铁调节蛋白 奈瑟菌形态 革兰阴性双球菌 直径0.6~1.5μm 肾形或咖啡豆样，凹面相对 某些菌种形成荚膜 2．培养特性 营养要求高 专性需氧，初次分离需5%~7%CO2和高湿度 低于30℃不生长 孵育24h后在培养基上自溶 脑膜炎奈瑟菌 血琼脂平板或巧克力琼脂平板：光滑、湿润、 透明或半透明、直径1~2mm的不溶血、圆形、露珠状菌落 卵黄琼脂平板：无色、光滑、湿润奶油状菌落 淋病奈瑟菌 巧克力或MTM选择性培养基（万古霉素） :菌落圆形，光滑湿润、凸起、半透明 自溶 3．生化特性 氧化酶阳性，触酶阳性 4．抵抗力 很弱 四敏感：热、寒冷、干燥、消毒剂 对青霉素敏感 近年来由质粒介导的β内酰胺酶所致的耐药在淋病奈瑟菌中产生较多 （一）脑膜炎奈瑟菌 1、标本采集 脑脊液、关节液、血液、瘀点穿刺液等 采集后立即送检 标本运送时需要35℃保温 血平板床边接种后置35℃孵育 血标本接种在血液培养瓶中置35℃孵育 2、标本直接检查 直接涂片检查 脑脊液直接或经离心后取沉淀涂片 皮肤瘀点渗出液涂片 见白细胞内外革兰阴性双球菌，可报告“检出革兰阴性双球菌，疑似脑膜炎奈瑟菌”。有助于流行性脑脊髓膜炎早期诊断 抗原检查 胶乳凝集试验和其他凝集试验 包括A、C、Y、W125血清型的多价抗体和血清型B抗体 检测结果结合涂片和培养结果 抗原检测阳性结果可作出快速、推测性诊断 3、分离培养鉴定 脑脊液 巧克力琼脂或羊血琼脂平板 咽拭子或鼻咽拭子 选择性培养基上如改良的Thayer-Martin(MTM)、GC-Lect、New York City(NCY)等培养基 血标本 经增菌培养基增菌后，移种至巧克力琼脂或羊血琼脂平板 置5%~7%CO2 35℃孵育，每隔24h观察平板 鉴定 初步确定为奈瑟菌属 直径1~2mm，灰褐色、光滑、半透明、稍扁的菌落 涂片革兰阴性双球菌 氧化酶触酶阳性 进一步：葡萄糖和麦芽糖阳性、其他糖 类阴性可确定为脑膜炎奈瑟菌 用分型血清确定血清型别 平板上未发现菌落，继续观察72h后无菌生长可报 告为阴性 （二）淋病奈瑟菌 检验程序 1．标本采集 阴道和宫颈分泌物 用无菌塑料棒涤纶拭子，伸入阴道后穹隆或宫颈内1cm处 停留10~15秒时间，蘸取 尿道分泌物 弃去前段脓性分泌物，留取后段作为标本 尿液 直肠肛拭标本 废弃第一根污染棉签，用第二根棉签醮取的分泌物 新生儿结膜炎时应采取眼结膜表面分泌物 2．标本直接检查 革兰染色镜检 男性尿道分泌物标本中可见中性多形核细胞内、外较多革兰阴性双球菌，有助于男性淋病早期诊断 女性宫颈或直肠拭子标本涂片中可见胞内、外大量革兰阴性双球菌，由于女性阴道和直肠有许多正常菌群寄居，故涂片所见结果必须由培养结果证实方可报告 新生儿结膜分泌物可见胞内、外大量革兰阴性双球菌可初步诊断为淋球菌性结膜炎 3．分离培养与鉴定 选择培养基如MTM，Martin-Lewis（ML），或NYC 5%CO2孵育 每隔24h观察平板 （1）形态和生化学鉴定 可疑菌落 直径0.5~1mm，灰褐色、光滑、半透明呈露滴状凸起的菌落 确认 菌落涂片，见革兰阴