两种方法检查新生儿溶血病的比较1课件.pptVIP

新生儿溶血病两种检查方法的比较分析 第三军医大学西南医院输血科 肖瑞卿 林武存等 新生儿母婴血型不合溶血病，是由于孕妇与婴儿血型不合引起的溶血病，主要包括ABO和Rh溶血病，主要检测方法是患儿红细胞上直接抗人-IgG（DAT）试验、血清游离抗体检测及患儿红细胞放散液鉴定三项试验。我们用两种方法对母婴血型不合进行检测并进行了比较，现将结果分析报道如下： 1 材料与方法 2.1 标本作ABO及Rh（D）血型鉴定，根据不同血型分为相合与不相合两组。ABO血型不合的患儿标本，离心分出上清，将红细胞洗涤三次，分别配成3-5%的红细胞混悬液及压积红细胞备用。 2.2 ABO不合三项检查： 患儿红细胞做DAT试验 患儿红细胞放散抗体 患儿血浆游离抗体 2004年以前用抗人-IgG试验(试管）法鉴定。2004年后检测红细胞上不完全抗体，用DAT试验；患儿血浆游离抗体试验，患儿红细胞放散及自身对照，用戴安娜卡式系统鉴定（抗体释放用56℃热放散法）。 　　2.3 洗涤A、B、O红细胞及O型谱细胞，分别配成3-5%备用。 2 　结果 　　3.1　585例中ABO血型相合的235例，不合350例，其中检测出抗-A 106例，抗-B 58例。Rh抗体6例（抗-D 4例、抗CD1例、抗cE1例）,共检测出抗体170例，占29%。无抗体415例，占71%。Rh血型抗体中，2例ABO血型不合，4例ABO血型相合， 　　 3.2 　用抗人-IgG法检测210例，阳性51例，占24.29%。用卡式检测375例，阳性119例，占31.7%，详细见表1。 表1 两种方法检查新生儿溶血病的比较 方法 ABO Rh相合 ABO相合 ABO不相合 抗-A 抗-B 抗-D 抗CD 抗cE 抗人-IgG 29 17 4 1 92 118 戴安娜卡式 77 41 1 143 232 　　 3.3 　164例ABO阳性病例分析 三项试验均为阳性108例，占65.9%；DAT试验阳性118例，占71.9%；放散试验阳性160例，占97.6%；游离抗体试验阳性150例，占91.5%。详细结果表2。 3 讨论 　　新生儿血型不合溶血病，是指母、婴血型不合引起的新生儿同种免疫性溶血疾病。至今发现的人类26个血型系统中，以A、B、O血型不合新生儿溶血病为最常见，其次为Rh血型系统。 　　上海血液中心曾报告检测834例新生儿溶血病，其中A、B、O溶血病712例（85.3％），Rh溶血病122例（14.6％）。我们检测ABO不合占96.47%，Rh血型不合占3.5%。 　　三项试验，以放散阳性比例最高，DAT试验阳性比例最低，可能为新生儿由于发育不成熟，红细胞上A、B抗原相对较少，DAT试验常显阴性结果，红细胞DAT试验结果阴性，不等于没有结合IgG，只是抗体的数量还没有达到DAT试验阳性的要求。应以放散结果为准，如果单是DAT试验与游离抗体试验阳性应于临床症状结合予以治疗。 　　　游离抗体和放散液鉴定结果： 抗人-IgG法检测210例，阳性51例(24.29%。 卡式检测375例，阳性121例，占例31.7%。 卡式阳性检出率明显高于传统的抗人-IgG法，结果同报道相符。 　　卡式法是生物化学凝胶过滤技术和免疫学抗原抗体反应相结合的产物，通过调节凝胶的浓度来控制凝胶间隙的大小。使其间隙只能允许游离的 RBC 通过，抗原抗体结合的红细胞则不能通过，通过离心法，使游离 RBC 与凝集 RBC 分离。 　　游离的红细胞通过离心 RBC 沉积在凝胶管底部，则表明 RBC 未发生凝聚凝集，呈阴性反应。若 RBC 聚集在凝胶带上部或凝胶中，则表明 RBC 发生凝集，呈阳性反应。 　　　凝胶中已加抗人-IgG，加入样本即可，从而简化了操作。结果稳定且易保存，灵敏度高，能检测到十分微弱的抗原抗体凝集反应。样本用量少，利于新生儿及少血样本的检测，重复性好。操作标准化，减少了人员的随意性操作，是一种可靠的试验方法。