微生物学实验-5 酵母菌装片的制作及观察;霉菌装片的制作及观察.ppt

实验九酵母菌装片的制作及观察 实验目的 1. 观察酵母菌的形态及出芽生殖方式，学习并掌握区分酵母菌死活细胞的实验方法。 2. 掌握酵母菌的一般形态特征及其与细菌的区别。 实验材料 菌种：酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）培养约2天的斜面培养物、醪糟。 试剂： 0.05％吕氏碱性美蓝染色液 仪器或其他用具：胶头滴管、盖玻片、载玻片、接种环、镊子、光学显微镜等。 　⑴ 在载玻片中央加一滴0.l％吕氏碱性美蓝染色液，然后按无菌操作用接种环挑取少量酵母菌苔放在染液中，混合均匀。染液不宜过多或过少，否则，在盖上盖被片时，菌液会溢出或出现大量气泡而影响观察。 ⑵ 用镊子取一块盖玻片，先将一边与菌液接触，然后慢慢将盖玻片放下使其盖在菌液上。盖玻片不宜平着放下，以免产生气泡影响观察。 ⑶ 将制片放置约3 min后镜检，先用低倍镜然后用高倍镜观察酵母的形态和出芽情况，并根据颜色来区别死活细胞。 ⑷ 染色约30min后再次进行观察，注意死细胞数量是否增加。 注意事项 1. 染液不宜过多或过少，否则，在盖上盖被片时，菌液会溢出或出现大量气泡而影响观 察。 2. 盖玻片不宜平着放下，以免产生气泡影响观察。 实验十霉菌装片的制作及观察 实验目的 学习并掌握观察霉菌形态的基本方法。 了解常见霉菌的基本形态特征。 实验器材 菌种 ：青霉（Penicillium sp.） 曲霉（Aspergillus sp.） 根霉（Rhizpus sp.） 毛霉（Mucor sp.） 试剂：棉兰乳酚油 仪器或其他用具：载玻片、盖玻片、解剖针以及显微镜等。 注意事项 1. 制片时要细心，尽可能保持霉菌自然生长状态。 2.制片时要挑取尽可能少的菌丝，并用解剖针小心分散。 3.浮载剂棉兰乳酚油用量要适中，盖上盖玻片时，应尽量避免产生气泡。 思考题 1. 你认为在显微镜下，细菌、放线菌、酵母菌和霉菌的主要区别是什么？ 实验报告 Penicillum sp. 10×10 Aspergillus sp. 10×40 Rhizopus sp. 10×10 Mucor sp. 10×40 * 实验目的 实验原理 实验材料 实验方法 实验结果 注意事项 实验报告 思考题 微生物学实验-5 酵母菌是不运动的单细胞真核微生物，其大小通常比常见细菌大几倍甚至十几倍。大多数酵母以出芽方式进行无性繁殖，有性繁殖是通过接合产生子囊孢子。本实验通过美蓝染液水浸片来观察酵母的形态和出芽生殖方式。美蓝是一种无毒性的染料，它的氧化型呈蓝色，还原型无色。用美蓝对酵母的活细胞进行染色时，由于细胞的新陈代谢作用，细胞内具有较强的还原能力，能使美蓝由蓝色的氧化型变为无色的还原型。因此，具有还原能力的酵母活细胞是无色的、而死细胞或代谢作用微弱的衰老细胞则呈蓝色或淡蓝色，借此即可对酵母菌的死细胞和活细胞进行鉴别。 实验原理 实验方法—美蓝浸片的观察 高倍下镜检 加盖玻片 染色2～3分钟 取美蓝染色液一滴，置于载玻片中央 实验方法—美蓝浸片的观察 用接种环取少许酵母菌与染色液混匀 实验结果 实验报告 Saccharomyces cerevisiae 10×40 醪糟中的酵母菌 10×40 死亡率= ———————×100％ 死细胞总数 死活细胞总数 思考题：醪糟中为何有这麽多的酵母菌？ 实验目的 实验原理 实验器材 实验方法 实验结果 注意事项 实验报告 思考题 微生物学实验-5 霉菌可产生复杂分枝的菌丝体，分基内菌丝和气生菌丝，气生菌丝生长到一定阶段分化产生繁殖菌丝，由繁殖菌丝产生孢子。霉菌菌丝体（尤其是繁殖菌丝）及孢子的形态特征是识别不同种类霉菌的重要依据。霉菌菌丝和孢子的宽度通常比细菌和放线菌粗得多，因此，用低倍显微镜即可观察。观察霉菌的形态常用插片法。 实验原理 高倍下镜检 加盖玻片 取棉兰乳酚油染色液一滴，置于载玻片中央 实验方法—棉兰乳酚油浸片的观察 用接种针挑取少许菌丝与染色液混匀 实验结果 青霉（10×40） Fungal Mycelium with Spores, Penicillium sp. (SEM x3,220) 青霉 青霉的帚状枝 帚状分枝小梗 分生孢子 分生孢子梗 曲霉（10×40） 曲霉的分生孢子头 分生孢子梗 顶囊 初生小梗 次生小梗 分生孢子 曲 霉 曲霉的足细胞 根霉（10×4） 根霉（10×40） 根霉 毛霉（10×40）