愈伤组织培养2.ppt

愈伤组织的器官发生顺序有四种情况： （1）愈伤组织仅有根或芽器官的分别形成，即无根的芽或无芽的根； （2）先长芽，后长根，多数情况； （3）先长根，再从根的基部长芽。这种情况较难诱导芽的形成，尤其对于单子叶植物； （4）先在愈伤组织的邻近不同部位分别形成芽和根，然后两者结合起来形成一株植株。 第三节愈伤组织的形态发生 愈伤组织 芽分化 再生苗 第三节 愈伤组织的形态发生 小麦的形态发生 试管苗 胚状体（embryoid）：指在组织培养中，由一个非合子细胞(体细胞)，经胚胎发生和胚胎发育过程（经过原胚、球形胚、心形胚、鱼雷胚和子叶胚5个时期），形成具有双极性的胚状结构。 第三节 愈伤组织的形态发生 二、胚状体方式（somatic embryo） 注意：体细胞胚 1、不同于合子胚 2、不同于孤雌/雄胚 3、不同于器官发生方式形成的幼苗 第三节 愈伤组织的形态发生 胚状体与合子胚的比较: 合子胚 胚状体 质量 萌发率高，质量好 萌发率低，质量差 来源 受精卵 体细胞 胚柄 有，明显 即使有也不明显 形态 固定，体积相对较小 复杂，常有两个以上的子叶，体积较大 变异率 低 高 第三节 愈伤组织的形态发生 由外植体经胚状体形成完整植株的过程： 外植体 脱 分 化 愈伤组织 胚状体 再生植株 第三节 愈伤组织的形态发生 胚状体发生途径与器官发生途径形成植株的区别: ①胚状体具有两极性，即有茎端和根端。 ②胚状体的维管组织与外植体的维管组织无解剖结构上的联系。 ③胚状体维管组织的分布是独立的“Y”字形。 第三节 愈伤组织的形态发生 体细胞胚发生与器官发生 第三节 愈伤组织的形态发生 胚状体方式比不定芽方式有更多的优点： 胚状体产生的数量比不定芽多； 胚状体可以制成人工种子，便于运输和保存； 胚状体的有性后代遗传性更接近母体植株。 第三节 愈伤组织的形态发生 第四节 愈伤组织培养的应用 1、加快了园艺植物新品种和良种繁育速度； 2、培育无病毒苗木； 3、获得倍性不同的植株； 4、克服远缘杂交困难； 5、利于种质资源长期保存和远距离运输； 6、提供育种中间材料； 7、诱发和离体筛选突变体； 8、制造人工种子。 第四节 愈伤组织培养的应用 本章小结： 1、愈伤组织培养含义 2、愈伤组织形成分三个时期：诱导期、分裂期、分化期。 3、诱导期、分裂期、分化期细胞的特点 4、分裂期愈伤组织的特征：细胞分裂快，结构疏松，缺少有组织的结构，维持其不分化的状态，颜色浅而透明。 5、继代培养的含义。 6、培养方式分为固体和液体培养两大类。 7、形态建成含义 。 8、器官发生形成小苗的方式 。 9、胚状体发生途径与器官发生途径形成植株的区别 第2章 愈伤组织培养 第2章 愈伤组织培养 第2章 愈伤组织培养 本章主要内容： 愈伤组织的诱导与分化 愈伤组织的继代培养 愈伤组织的形态发生 不定芽和根的发生 体细胞胚的发生 愈伤组织培养的应用 1、了解愈伤组织细胞分化的各时期的特点 2、掌握植物激素控制理论 3、掌握愈伤组织的形态发生 4、区别胚状体发生途径与器官发生途径形成植株 5、愈伤组织培养在园艺植物育种中的应用 本章教学目的与要求 定义:是指将外植体接种到人工培养基上，在激素作用下，进行愈伤组织诱导、生长和分化的培养过程。 愈伤组织培养(callus culture) 第一节 愈伤组织的诱导和分化 一． 愈伤组织的诱导 诱导愈伤组织的关键主要是培养条件，其中激素的成分和浓度是最重要的因素。 Callus arising from leaf tissue Callus arising from vascular tissue From root From embryo culture Photo indicating where the callus (c) arises from Wound callus on the stemof an Erythrina tree 刺桐树 第一节愈伤组织的诱导和分化 二．愈伤组织的分化 从外植体脱分化形成典型的愈伤组织大致可分为三个时期： 愈伤组织分化 诱导期 分裂期 分化期 Stage 1. Induction（诱导期）: 细胞准备进行分裂的时期，是愈伤组织形成起点。 诱导期细胞内发生的变化 气体交换增加，如氧气的吸收增加 RNA含量增加（增加到300%） 蛋白质量增加（每个细胞的总增加量为200%） 酶活性增强 Stage 2. Cell division 分裂期 指外植体细胞经诱导脱分化，不断分裂、增生子细胞的过程。 1.细胞的数目迅速增加。 2.每个细胞平均鲜重下降。 3.细胞体积小，内无液泡。 4．细胞的核和核仁增大到最大。 5.细胞中RNA含量减少，而