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流式细胞分选仪原理和应用 分选流式基本原理 分选流式两种激发方式 细胞激发方式 石英杯激发：光路固定。 空气激发：光路不固定。 分选流式应用 • 免疫学 高速平台分选流式基本要求： • 血液学 分选速度快； • 肿瘤学 分选活性、纯度、得率高； • 干细胞 • 神经生物学 光路固定，无需调光路； • 信号传导 采用全自动化dropdelay计算方法。 • 生殖发育 • 染色体/精子分选 • 植物学 、、、、 分选流式定律：分选速度、得率和纯度相互制约 分选速度 分选纯度 分选得率 Aria在这三个方面达到最佳的一个平衡 1. 分选速度 分选速度：振荡频率、鞘液压力和喷嘴大小有关。 分选速度和样本浓度、振荡频率、鞘液压力成正比，与喷嘴大小成反 比。现在国内用户用的喷嘴大小只有70um-100um，在这两种喷嘴使 用条件下，70um喷嘴对应：鞘液压力都是在60-70psi，振荡频率90- 100KHz；100um喷嘴对应：鞘液压力在25psi左右，振荡频率在 40KHz左右，所以说在实际使用中，对用户真正有意义的喷嘴大小 70um-100um的喷嘴，振荡频率低于100KHz，鞘液压力低于70psi。 在所有实际分选中，分选速度一般不超出20000细胞/秒。 2. 分选得率、纯度和活性高 分选得率：目的细胞的百分比、分选速度、分选纯度成反比 。 分选纯度 • 1. 液滴延迟 • 2. 液滴分析精度 • 3. 分选速度 • 4. 液流稳定性（石英杯激发保证液流不受气流和温度变 化而变化，是最稳定的） 分选调试的方便性、灵活性 细胞被检测至包含该细胞的液滴被充 电偏转的时间需要精确计算，才能保 证稀有细胞的纯度和得率，这就是 drop delay。 •AccuDrop功能(BD专利)， 软件自动快速精确计算液滴 延时，保证分选的纯度和得 率 最大限度的纯化细胞：最高的分选纯度（液滴32等分） Yield模式 分选活性（多种因素决定）--Aria具备最好活性 • 1. 样本准备 • 2. 鞘液压力和喷嘴大小 • 3. 管路的无菌性 • 4. 分选样本和收集样本温度控制 • 5. 分选收集时的自动减速系统 • 6. 液流的稳定性 • …. 1.免疫学：需要多激光多色分析分选，低含 量分选。 流式最初应用领域，目前和免疫相关研 究都会用到分选流式，但是其对分选流 式提出了多激光多色和分析分选速度快 的要求。 低含量信号检测：快速分析/分选