SOP重金属检查法操作规程.doc

起草人： 日期： 审 核 人： 日期： 批准人： 日期： 执行日期： 颁发部门：质量部 拷贝号： 变更记载： 制定（变更）原因及目的：新建 修订号 批准日期 执行日期 01 02 分发部门 质 量 部 [ ]份 生 产 部 [ ]份 财 务 部 [ ]份 物 料 部 [ ]份 行政人力资源部 [ ]份 销 售 部 [ ]份 重金属检查法操作规程 目的：建立重金属测定法检验的标准操作程序，确保重金属测定法检验结果的准确性。 适用范围 适用检验操作中重金属的检查。 职责 检验员：严格按操作规程进行检验 QC主管：监督检查执行情况 简述 重金属是指在规定实验条件下能与显色剂作用的金属盐类杂质。中国药典2010年版附录ⅧH采用硫代乙酰胺试液或硫化钠试液作显色剂，以铅 (Pb)的限量表示。由于实验条件不同，分为4种检查方法:第一法适用于供试品不经有机破坏，在酸性溶液中显色的重金属限量检查;第二法适用于供试品需灼烧破坏，取炽灼残渣项下遗留的残渣，经处理后在酸性溶液中显色的重金属限量检查;第三法用来检查能溶于碱而不溶于稀酸 (或在稀酸中即生成沉淀)的药品中的重金属;第四法用微孔滤膜过滤，使重金属硫化物沉淀富集成色斑，用于有色溶液或重金属限量较低的品种。四种方法显示的结果均为微量重金属的硫化物微粒均匀混悬在溶液中所呈现的颜色;采用滤膜法可获得色斑;如果重金属离子浓度大，加入显色剂后放置时间长，就会有硫化物聚集下沉。 4.实验条件：重金属硫化物生成的最佳pH值是3.0-3.5，选用醋酸盐缓冲液 (pH3.5)2.Oml调节pH值，显色剂硫代乙酰胺试液用量为2.0ml，显色时间一般为2分钟。以10-2Oμg的Pb与显色剂所产生的颜色力最佳目视比色范围。在规定实验条件下，与硫代乙酰胺试液在弱酸条件下产生的硫化氢呈色的金属离子有银、铅、汞、铜、镐、铋、锑、锡、砷、锌、钴与镍等。由于在药品生产过程中遇到铅的机会较多，且铅易积蓄中毒，故以铅作为重金属的代表，用硝酸铅配制标准铅溶液。 5.仪器与用具 5.1纳氏比色管：应选玻璃质量较好、无色(尤其管底)、配对、刻度标线高度一致的纳氏比色管，洗涤时避免划伤内壁。 5.2滤器：见中国药典2010年版附录Ⅷ H重金属检查法第四法附图，由具有螺纹丝扣并能密封的上、下两部分以及垫圈、滤膜和尼龙垫网组成。滤器上盖部分A的入口处应能与5Oml注射器紧密联接，滤器下部F的出口处能套上一合适橡皮管。A与F能通过螺纹丝扣密封。垫圈应内径光滑、大小相同，以使斑点边缘圆整、清楚、大小一致。在滤器上加上橡皮垫圈，既可使滤膜与滤板紧密结合，又可避免在旋紧滤器接头时扭曲或损坏滤膜。 5.3滤膜的直径为1Omm，孔径为3.0μm，使用前在水中浸泡24小时以上，可使色斑均匀。 5.450m1注射器，应能与滤器上盖入口处紧密连接。 6试药和试液 6.1标准铅溶液 精密称取在105℃干燥至恒重的硝酸铅0.160g，置1000m1量瓶中，加硝酸5m1与水50m1溶解后，用水稀释至刻度，摇匀，作为贮备液。临用前，精密量取贮备液10m1，置100m1量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得 (每1m1相当于10μg的Pb)。 6.2硫代乙酰胺试液、硫化钠试液、醋酸盐缓冲液(pH3.5)与抗坏血酸等均按药典附录XV的规定。 6.3稀焦糖溶液：取蔗糖或葡萄糖约5g，置磁坩埚中，在玻璃棒不断搅拌下，加热至呈棕色糊状，放冷，用水溶解成约25m1，滤过，贮于滴瓶中备用。临用时，根据供试液色泽深浅，取适当量调节使用。 7操作方法 7.1第一法 7.1.1取25m1纳氏比色管两支，编号为甲、乙。 7.1.2甲管中加标准铅溶液一定量与醋酸盐缓冲液(pH3.5)2m1后，加水或该供试品正文项下规 定的溶剂稀释成25m1。 7.1.3乙管中加入按该供试品正文项下规定的方法制成的供试液25m1。 7.1.4如供试液带颜色，可在甲管中滴加少量稀焦糖溶液或其它无干扰的有色溶液，使其色泽与乙管一致。 7.1.5在甲、乙两管中分别加硫代乙酰胺试液各2.0m1，摇匀，放置2分钟，同置白色衬板上，自上向下透视，乙管中显出的颜色与甲管比较，不得更深。 7.1.6如在甲管中滴加稀焦糖溶液仍不能使颜色一致时，可取该药品项下规定的2倍量的供试品和试液，加水或该药品正文项下规定的溶剂使成30m1，将溶液分成甲乙2等份，乙管中加水或该供试品正文项下规定的溶剂稀释成25m1;甲管中加入硫代乙酰胺试液2.0m1，摇匀，放置2分钟，经滤膜 (孔径3um)滤过，然后甲管中加入标准铅溶液一定量，加水或该药品项下规定的溶剂使成25m1，再在乙管中加