实验、两栖类循环系统浸渍标本制作与骨骼系统制作.ppt

两栖类循环系统图 两栖类心脏 两栖类循环系统图 两栖类骨骼标本制作 目的 学会小型脊椎动物骨骼标本制法。 学习两栖类骨骼标本的基本制作方法，了解两栖类骨骼的基本组成。 一、材料和器具 1、蟾蜍一只 2、手术剪刀一把 3、一根大头针 4、镊子 5、电吹风 6、502胶水一瓶 7、旧牙刷一把 8、一个可以加热煮水的器皿。 2、处死；在蟾蜍的脑后，头骨与脊椎骨连接处背侧，有个枕骨大孔，用大头针从这儿次劲头骨脑腔里边，搅动数下。 二、剥皮；从肛孔到下巴顶部，用剪刀剪开，当心不要剪坏胸骨。从这条开口向四肢各剪一条开口，把皮肤剥下来。然后剪开腹部的肌肉层，用镊子把内脏摘除来。 三、加热；把整理好的蟾蜍放入沸水中加热五分钟，期间用镊子翻转几下，至肌肉变得很容易撕下来就可以了。 四、剔肉；把煮好的蟾蜍分成头、肩带和前腿、脊椎和腰带、后腿四个部分来进行剔肉（两个后腿骨骼第一次做容易混淆，最好加上标记用以区分）。四肢上的大块肌肉用镊子去除，其他肌肉用旧牙刷一点一点的刷掉。剔肉是制作骨骼标本的关键，要小心不要把指骨弄散了而让它们依然依靠筋腱连接在一起， 这样整形装架时可以简单些。下颌骨也要尽量和头骨连在一起，如果发生指骨和下颌骨或其他骨分离的情况，把分离的部分小心剔净保存好，以后整形时在粘上去。 五、脱脂；骨骼上的肌肉都剔干净以后，把整具骨架充分晾干，在密封的容器中用汽油浸泡两天，除去骨各种的油脂，这样骨架做好后不会发霉，可以长久保存。或也可省去脱脂步骤，将骨骼冲洗后浸入0.5～0．8％过氧化钠1～3天。 六、漂白；脱脂完毕的骨架，从汽油中捞出来，晾晒一天，等汽油完全挥发后，放入3%的双氧水中浸泡一天，这样可以把骨骼漂白，使骨架看起来更美观一些。 七、装架；漂白完毕，把骨架在清水中漂洗一下，就可以装架了。趁着手掌骨和脚掌骨湿润可以活动，把它们整理平整，用电吹风吹干定型，关节之间点入胶水加固。 把头骨和脊椎骨吹干，在关节窝上点上胶水连接起来。两片肩胛骨分别粘在对应的第二、三两块脊椎骨的侧向突起上，调节好前腿骨骼和脊椎骨的角度用胶水连接定型，在将后腿骨骼整理好关节之间的角度后，粘接在对应的关节窝上。 两栖类骨骼系统 透明骨骼标本的制作 实验前的思考 脊椎动物的骨骼是包裹在皮肤和肌肉中的，不能直接观察到。假如设法除去它们的皮肤，用药物使肌肉变得透明，那么，这些小动物的骨骼，就能完整地显示出来，并且保持它的自然状态。如果再用药物使它们的骨骼染上颜色，效果更佳。  材料器具 小型脊椎动物如鱼、蛙、小白鼠；解剖器，标本瓶，玻璃片，注射器，绳；95％乙醇，氢氧化钾溶液，茜素红，甲醛，过氧化氢溶液，纯甘油，水合氯醛，冰乙酸，阿利新蓝-8GX，胰蛋白酶，硼砂溶液，麝香草酚，清水，重铬酸钾溶液，染色液，褪色液，稀过氧化氢溶液，染色原液，软骨染色液，硬骨染色液，胰蛋白酶混合液。 1.取材 新鲜的小型脊椎动物，如鱼、蛙等，长度在10～20厘米，以活体为好。 2.固定 材料洗干净。如果是鱼，应该先去鳞，再洗净。然后，放入95％乙醇中固定1～2天。如果材料已经用5～10％甲醛液保存过，则要用清水漂洗后再浸在95％乙醇中，使它充分固定。 3.去皮 用解剖器剥去小动物的外皮。 4.脱脂 把去皮后的标本用绳缚在玻璃片上，整理好姿势，浸在3%重铬酸钾溶液中几天，除去材料表面的脏物和脂肪粒块。当溶液变混浊时，更换新液，直到溶液不混浊为止。取出标本，用清水洗干净，再浸入95%乙醇中脱脂一周左右。 5.透明 标本转入20%氢氧化钾溶液中。一周左右，见肌肉呈半透明状态，里面骨骼隐约可见，即终止透明。 6.染色 把透明后的标本浸入0.01%茜素红染液中2～3天，到骨骼染上红色为止。 7.褪色 先把标本放入2％氢氧化钾溶液中浸1天，然后转入褪色液中10天左右，到肌肉上的颜色褪至淡粉红为止。 8.漂白 用稀过氧化氢溶液，浸至肌肉完全透明，骨骼呈紫红色为止。9.保存 先用注射器抽去标本内的气泡，再放入纯甘油中保存。 * 　蟾蜍循环系统浸渍标本制作 指导教师：许维岸、顾福根 二、实验内容 1. 注射色剂的配制。 2. 蟾蜍心脏的解剖和动脉注射。 3. 蟾蜍腹静脉的剥离和静脉注射。 一、实验目的 观察蟾蜍的心血管系统，了解两栖类心脏的构造、循环途径及其特点。 三、操作步骤 处死： 双毁髓法处死蟾蜍，腹面朝上置于蜡盘中，沿腹中线偏左剪开腹腔直到肩带，再剪断肩带的呜喙骨和锁骨。 穿线：剪开围心膜提起心脏，将线合成双股从动脉圆锥背面穿进去后再剪为两股，靠近心室的一根扎紧以防注入静脉窦，另一根打个结但不扎紧。 动脉注射：抽取3～5ml红色的注射色剂，将针尖刺入动脉圆锥，快速推入色剂，直到肠系膜或皮肤的小