第十二章食品添加剂的测定.ppt

亚硝酸盐的测定： 吸取40.0mL上述滤液于50mL比色管中，另吸取0.00、0.20、0.40、0.60、0.80、1.00、1.50、2.00、2.50mL浓度为5.0μg/mL亚硝酸钠标准使用液(相当于0、1、2、3、5、7.5、10、12.5μg亚硝酸钠)，分别置于50mL比色管中。于标准与样品管中分别加入2mL0.4％对氨基苯磺酸溶液，混匀，静置3-5min后各加入1mL0.2％盐酸萘乙二胺溶液，加水至刻度，混匀，静置15min，用2cm比色杯，以零管调节零点，于波长538nm处测吸光度，绘制标准曲线比较。同时做试剂空白。 计算结果：保留两位有效数字 注意事项： 对氨基苯磺酸、盐酸萘乙二胺及硝酸盐标准溶液见光均不稳定，应放置冰箱中避光保存，尽快使用。 对氨基苯磺酸在水中不易溶解，配制时可用温水或超生促进溶解。 饱和硼砂溶液呈碱性，pH值9.1~9.3，使样品处理液保持碱性。（由于亚硝酸盐在酸性介质中是强氧化剂，易被还原，因此碱性环境可以避免亚硝酸盐被还原，利于亚硝酸盐的提取和沉淀蛋白质。） 宜选择不含以及对亚硝酸盐无吸附性的滤纸。 加显色剂时要依此加入，顺序不能颠倒。显色反应需要在一定时间后达到稳定浓度，在此期间测定最佳，应尽快测定。如放置时间过长会因受光等作用分解，使溶液的吸光度下降。 最佳吸光度范围在0.2~0.7之间，此范围可减少测量误差。 吸收波长从550nm改为538nm。 二、硝酸盐的检测 镉柱法 1. 原理 样品经沉淀蛋白质、去除脂肪后，得到提取液，将提取液通过镉柱，在pH9.6～9.7的氨缓冲液中，使其中的硝酸根还原为亚硝酸根，然后利用盐酸萘乙二胺法测定亚硝酸盐的总量，由总量减去还原前亚硝酸盐含量，即为由硝酸盐还原产生的亚硝酸盐含量。再乘以换算系数，即得硝酸盐含量。 在镉柱中，镉定量地将 NO3-还原成NO 2- Cd十N03- CdO十N02- 2.操作步骤： （1）镉柱 海绵状镉粉的制备 镉柱的装填 镉柱还原效率的测定 （2）试样处理 （3）测定 先以25mL稀氨缓冲液冲洗镉柱，流速控制在3-5mL/min。 吸取20mL处理过的样液于50mL烧杯中，加5mL氨缓冲溶液，混合后注入贮液漏斗，使流经镉柱还原，以原烧杯收集流出液，当贮液漏斗中的样液流完后，再加5mL水置换柱内留存的样液。 将全部收集液再经镉柱还原一次，第二次流出液收集于100mL容量瓶中，继续以水流经镉柱洗涤三次，每次20mL，洗液一并收集于同一容量瓶中，加水至刻度，混匀。 亚硝酸钠总量的测定 亚硝酸盐的测定 计算结果：保留两位有效数字 镉柱经使用后用稀盐酸除去表面的氧化镉可重新使用 CdO十2HCl CdCl2十H2O 注意： 镉在空气中会迅速氧化为氧化镉，从而失去还原能力，因此在制备镉粉和装柱的过程中要始终避免镉粉与空气接触。在制取海绵状镉和装填镉柱时最好在水中进行。 亚硝酸盐、显色剂及显色反应产物见光均易分解，因此整个实验过程应避免在阳光直射下进行。  §5 漂白剂——二氧化硫及亚硫酸盐的测定 漂白剂是为使食品保持特有的色泽、褪色或不褐变。依靠漂白剂的氧化或还原能力，破坏食品的变色因子。 1. 食品中的漂白剂本身无营养价值。 2. 严格控制使用量，因为对人体健康有一定影响。 3. 要求对食品的品质、营养价值及保存期不应有不良影响。 《食品中亚硫酸盐的测定》GB/T 5009.34—2003： 盐酸副玫瑰苯胺法 蒸馏法 一、盐酸副玫瑰苯胺比色法(国标中第一法） (一)原理 亚硫酸盐或二氧化硫，与四氯汞钠反应生成稳定的络合物，再与甲醛及盐酸副玫瑰苯胺作用生成紫红色物质，其色泽深浅与亚硫酸含量成正比，可比色测定。反应式如下： α—羟基磺酸 盐酸副玫瑰苯胺 黄色 副玫瑰苯胺 Α—羟基磺酸 （二）操作方法 （三）计算：保留三位有效数字 （四）说明 颜色较深样品，需用活性炭脱色。 样品中加入四氯汞钠吸收液以后，溶液中的二氧化硫含量在24小时之内稳定，测定需在24小时内进行。 （四氯汞钠作为萃取剂，如果用水萃取，易造成SO2的丢失，20℃时，1体积水溶解40体积SO2）。 此方法适用于含SO2 ＜ 50 ppm,含量高时适于用碘量法及中和法测定。 四氯汞钠毒性甚大，有人研究用EDTA代替。 亚硫酸在食品中与醛、酮和糖相结合。加碱是将糖中的二氧化硫释放出来，加硫酸是为了中和碱，因为总的显色反应是在微酸性条件下进行的。 用四氯化汞溶液吸收亚硫酸盐，立即比色，测定的是游离二氧化碳；放置4h后，结合型缓慢释放，但还不完全；加碱使结合型二氧化硫释放，测定的是总二氧化