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杜仲不同提取部位对肾阳虚小鼠抗氧化和抗抑郁作用的影响论文.doc
杜仲不同提取部位对肾阳虚小鼠抗氧化和抗抑郁作用的影响论文
吕圭源 陈素红 苏洁 颜美秋 范景 张益勋 方哲 张伟
【摘要】 目的]观察杜仲三个部位对肾阳虚小鼠的抗氧化和抗抑郁作用,为认识杜仲“甘温,入肝、肾经”药性的现代科学内涵提供药效学基础。[方法] ICR雄性小鼠,随机分为正常对照组,模型对照组,桂附地黄丸组,杜仲水部位组、正丁醇部位组、乙酸乙酯部位组。采用腹腔注射苯甲酸雌二醇造成小鼠肾阳虚模型。对小鼠抗氧化指标(SOD、GSHPx、CAT活性及MDA含量)、抗抑郁指标(悬尾、MAO活性)、疲劳指标等进行测定。[结果]抗氧化指标:杜仲三个部位都能降低MDA含量、提高SOD活性,杜仲水部位和正丁醇部位能提高CAT活性.freelia ulmoides Oliv.树皮的炮制品。取药材用10倍体积95%乙醇2次,分别制成乙酸乙酯部位、正丁醇部位,再用10倍体积水提取2次制成水部位。水、正丁醇、乙酸乙酯部位分别加吐温-80稀释至0.125g生药/ml。
1.2 试剂 超氧化物歧化酶、谷胱胺肽过氧化酶、过氧化氢酶、单胺氧化酶、丙二醛试剂盒(SOD、GSHPX、CAT、MAO、MDA,南京建成生物工程研究所,批。苯甲酸雌二醇(上海通用药业股份有限公司,批号070905)。桂附地黄丸(兰州太宝制药有限公司,批。
1.3 动物 ICR小鼠,雄性,体重18~22g,由上海斯莱克实验动物有限责任公司提供,合格证号: SCXK(沪)2007-0005。
1.4 仪器 YLS18A小鼠悬尾测试仪(山东省医学科学院设备供应维修站);YLS10A小鼠转轮式疲劳仪(山东省医学科学院设备供应维修站);酶标仪(美国BioTEK公司,Pog/ml的苯甲酸雌二醇大豆油稀释液,每日1次,连续13d,造成肾阳虚模型[2],体积为0.1ml/10g体重。各受试药组给予相应的药物0.125g生药/ml,桂附地黄丸组给予0.15g生药/ml桂附地黄丸混悬液,对照组和模型组给予0.4%吐温-80,灌胃给药,每日1次,连续30d,体积为0.1ml/10g体重。
2.2 指标检测 期间观察以下指标:抗氧化指标:SOD活性、GSHPX活性、CAT 活性、MDA含量的测定:方法参照试剂盒说明书。抗抑郁指标:平行测试各小鼠悬尾6min内的总活动时间和活动时间比;MAO测定:方法参照试剂盒说明书。平行测试各小鼠在转棒式疲劳仪(参数:20转/min、电击电流量为0.25mA、电击持续时间为2.5s)上的奔跑时间及奔跑距离。
2.3 统计分析 数据以x± s表示,组间比较采用ttest检验。
3 结果
3.1 杜仲不同部位对雌二醇致肾阳虚小鼠的抗氧化作用
3.1.1 对雌二醇致肾阳虚小鼠肝脏抗氧化酶SOD、GSHPX和CAT活性的影响 与对照组比较,模型组肝脏抗氧化酶SOD、GSHPX和CAT活性均明显降低(P 0.01);与模型组比较,杜仲水部位组能显著提高肾阳虚小鼠肝脏SOD、GSHPX和CAT的活性,正丁醇部位组能明显提高SOD和CAT的活性,而乙酸乙酯部位组能显著提高SOD和GSHPX的活性(P 0.05~0.01)。结果说明杜仲能改善肾阳虚小鼠抗氧化酶的水平,见表1。
表1 对肾阳虚小鼠肝脏抗氧化酶SOD、GSHPX和CAT活性的影响(略)
与正常对照组比较,.freelin内的总活动时间和活动时间比(P 0.05),杜仲水部位组、正丁醇部位组和乙酸乙酯部位组均能抑制肾阳虚小鼠肝脏MAO活性(P 0.05~0.01)。表明杜仲对肾阳虚小鼠具有一定的抗抑郁作用,见表3。
表2 对肾阳虚小鼠肝脏抗MDA含量的影响(略)
与正常对照组比较,△P 0.05,△△P 0.01;与模型对照组比较*P 0.05,**P 0.01
表3 对肾阳虚小鼠悬尾时间及MAO活性的影响(略)
与正常对照组比较,△P 0.05,△△P 0.01;与模型对照组比较*P 0.05,**P 0.01
3.3 杜仲不同部位对雌二醇致肾阳虚小鼠抗疲劳能力的影响 与对照组比较,模型组在转棒式疲劳仪上的奔跑时间和奔跑距离明显减少(P 0.01);与模型组比较,杜仲水部位组、正丁醇部位组和乙酸乙酯部位组的奔跑时间和距离都显著增高(P 0.01)。结果说明杜仲具有增强肾阳虚小鼠体力、缓解疲劳的作用,见表4。
表4 对肾阳虚小鼠抗疲劳能力的影响(略)
与正常对照组比较,△P 0.05,△△P 0.01;与模型对照组比较*P 0.05,**P 0.01
4 讨论
肾为先天之本,内寓真阴真阳,为脏腑阴阳之本,肾虚则各脏腑皆虚,最易导致疾病和衰老。张景岳将早衰归之于肾阳虚,认为“肾阳衰则亡身之渐”,在其《类经附翼·大宝论
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