杜鹃花组织培养研究概况论文.docVIP

　　杜鹃花组织培养研究概况论文 郭秀莲，张正银，王晓东，樊哲仁，白洁，陈放 【摘要】 杜鹃花(Rhododendron)的组织培养受基因型、外植体的来源、培养基种类、培养条件、生长调节物质、培养程序等诸多因素的影响，故具有一定的复杂性。文章概述了影响杜鹃花组织培养的关键因素：外植体种类，外植体消毒灭菌的方法.freeledia, culture conditions, groe reference values to the tissue culture research,the paper reviee and abroad,including the type of explants, sterilization methods to explants, choice of the basic medium, rooting and so on. Key pionae与比利时杜鹃R. hybridun采用新发幼苗新梢。2001年钟宇3以不同季节的茎尖(含茎段)为材料，培养西洋杜鹃R. hybridn，结果表明，最适外植体为摘花芽后萌发的顶芽茎尖。2003年王亦菲等4对两种来自比利时的高山西洋杜鹃R. britannia，R. america的茎尖进行了成功培养。2003年梁晓华等5对亮毛杜鹃R. microphyton的茎尖进行了培养，但成功率不高。2004年闫凤霞等6选取杜鹃花R. simsii茎尖、嫩叶和老叶为外植体，诱导不定芽产生再生植株，结果表明茎尖、嫩叶效果较好。 1982年Meyer等7以花芽作外植体，成功培养了Nova Zembla，RoseumElegans，Sefon等品种的杜鹃。 1986年，从毛叶杜鹃R. mollium叶片培养得到植株8。1991年报道了以叶为外植体，离体条件下诱导杜鹃R.‘P.J.M. Hybride’植株再生9。1996年，从杜鹃R. simsii7个栽培品种Paloma，Avenir，Mme. Petrick，Aline，Flamenco，Lara和 Mme. M. DePaepe 叶片诱导植株，该试验从叶片诱导出了不定芽，但在进行生根诱导培养时未获得成功10。2003年秦静远等9从R. simsii品种“Hellmut Vogel”幼叶诱导出愈伤组织，并进一步分化为丛生苗。 1987年有报道从子房组织诱导杜鹃R. prinophyllum再生8。 1985年，有人培养春鹃和西鹃茎尖成功率仅4%～5%，后用种子无菌苗茎段培养获得成功。1991年，从茎段再生杜鹃R. laetum× aurigeranum获得成功8。2002年邓百万等10对比利时杜鹃的幼茎进行培养，使休眠腋芽萌发，且诱导出不定芽，并从幼叶诱导出愈伤组织。2004年，汤桂钧等11以德国产高山杜鹃R. lapponicum的茎段和茎尖进行外植体诱导试验，结果显示，茎段诱导无菌芽效果较好。2006年朱春艳等12以新发茎段为外植体，研究了云锦杜鹃R. fortunei的组培快繁技术，取得成功。2007年，罗彭等13以幼嫩茎段为外植体对大白杜鹃R. decorum、美容杜鹃R.calophytum、喇叭杜鹃R. discolor进行组培研究，效果较好。2008年程雪梅等14以马缨杜鹃R. delavayi的种子萌发的无菌苗茎段为外植体进行研究，获得成功。 1993年有报道从雄蕊诱导杜鹃R.‘P.J.M.’再生植株和器官发生13。 总结以上表明，最优良的外植体是旺盛生长季节(3月下旬到4月上旬)杜鹃新发枝的幼嫩芽15，这个时期外植体处于旺盛的生长状态而且芽的苞片还未展开，将带苞片的芽进行消毒，即使灭菌时间长一些也不会伤害到里面的茎尖生长点，接种后成活率高，增殖速度快，褐变程度轻。 2 外植体消毒灭菌的方法 在对三叶胶初级培养污染的研究中发现高温、多雨的环境易导致污染，而且随着植物材料年龄的增长，植物材料的健康状况不断恶化，组培污染也会更加严重，研究认为外植体带菌多少的顺序为：腋芽 茎尖 顶点16。外植体的状况、环境条件和操作过程是引起污染的主要原因。对大多数植物来说，采用新生的或新抽的枝条，4～5月份的新叶、茎尖、枝条，污染率可下降20%～30%。 杜鹃外植体消毒困难，腋芽，顶芽和雌蕊等幼嫩部位若消毒时间过长，容易死亡，若消毒时间缩短，则菌尤其是内源菌难以杀死。大多研究者采用自来水冲洗外植体5～30 min，饱和洗衣粉水洗5～30 min，自来水冲洗5～30 min，在无菌条件下用浓度70%酒精消毒15～30 s，无菌水冲洗1次，再用浓度0.1%HgCl2消毒5～8 min，无菌水冲洗4～10次。也有不经过70%酒精步骤，只用HgCl2消毒的。 2003年梁晓华等用浓度10%H2O2，2%Br2，2%