板蓝根F022部位抗内毒素分子机理研究论文.docVIP

　　板蓝根F022部位抗内毒素分子机理研究论文 林爱华，刘云海，刘奕明 【关键词】 板蓝根；,,F022部位；,,内毒素；,,分子机理 摘要：目的探讨板蓝根F022部位抗内毒素分子机理。方法内毒素定量检测法测定F022样品液对内毒素的破坏作用；研究样品液对内毒素致鼠巨噬细胞分泌炎性因子的抑制作用、对蛋白激酶MAPKp38活性的影响、对内毒素刺激鼠组织moesin mRNA分子表达及对内毒素诱导鼠体内TNFα,IL6和NO的抑制作用。结果1%F022对内毒素破坏率达到86.5%，F022能显著抑制内毒素刺激巨噬细胞分泌TNFα，IL6水平；抑制内毒素刺激蛋白激酶MAPKp38活性；降低内毒素刺激鼠肝、肾、脾组织moesin mRNA和体内TNFα，IL6和NO等炎性因子的表达。结论F022部位不仅直接破坏内毒素结构，且阻断内毒素引起的信号传导通路，从而抑制机体炎性因子的过度释放、抑制膜结构伸展刺突蛋白和丝裂原活化蛋白激酶的表达.freel of F022 from Radix Isatidis Abstract：ObjectiveTo study the anti-endotoxic molecular mechanism of F022 from Radix Isatidis. MethodsThe content of F022pretreated ET ined ulus test．The inhibition of TNFα and IL6 of murine peritoneal macrophages stimulated by LPS,the molecular expression of moesin mRNA, MAPK p38, TNFα,IL6 and NO in mice tissues induced by LPS echanism of F022. ResultsIt acrophages culture before addition of 50 ng ml 1LPS．Production of TNFα,.freelacrophages arkably decreased the molecular expression of moesin mRNA in liver，kidney，spleen induced by LPS in mice and inhibited production of TNFα, IL6 and NO in mice stimulated by LPS.ConclusionF022 from Radix Isatidis can not only destroy the structure of endotoxin, but also obstruct the signal transduction pathay be a strong antiendotoxin fraction in drugs research and development. Key echanism 内毒素(endotoxin，ET)是革兰氏阴性菌细胞壁外膜中的脂多糖(1ipopolysaccharide，LPS)成分。可刺激机体防御系统过度释放炎性因子肿瘤坏死因子(TNFα)、白细胞介素6(IL6)及一氧化氮(NO)等而引起发热、脓毒性休克、弥漫性血管内凝血(DIC)、多器官功能衰竭综合征(MODS)，以至死亡。中医对内毒素性疾病的早期表现常辨证为“实热证”，内毒素是“热毒、邪毒”的物质基础［1］。有关内毒素的研究一直是世界生物医学研究热点，而内毒素拮抗药的研究则是防治内毒素性疾病的重要策略之一。先前研究已证实板蓝根有抗大肠杆菌O111B4内毒素作用［2，3］，我们从中筛选出抗内毒素活性强的F022 部位［4，5］，为进一步探讨F022 部位抗内毒素机理，本文研究了F022 部位对内毒素致体内外分泌TNFα，IL6和NO的影响及对内毒素受体-膜结构伸展刺突蛋白(moesin)和内毒素介导的胞内信号传导过程中丝裂原活化蛋白激酶(mitogen activating protein kinases，MAPK)p38激酶的影响。现报道如下。 1 器材 1.1 药品与试剂F022 部位（本室制备）,冻干细菌内毒素工作标准品(E．coli O111B4，卫生部上海生物制品研究所，120EU／支)；Tris缓冲液(pH 7．2)；细菌内毒素(4 mg/支，中国药品生物制品检定所)；TNFα和IL6试剂盒(北京邦定泰克生物有限公司)；新生小牛血清(NBS，沈阳安迪生物高科技公司)；RPMI1640细胞培养液(Gibco公司)；0.9%氯化钠注射液(0.9%NS，连云港制药厂)；LPS(