桂枝甘草汤方药半仿生提取法药材组合方式的优选论文.docVIP

　　桂枝甘草汤方药半仿生提取法药材组合方式的优选论文 .freelize the best ingredients bination of Guizhi Gancao Decoction. Method The prescription i-bionic extraction. The contents of Glycyrrhetinic acid, Cinnamic acid, total flavones, volatile oil and dry extract in the each extract ined, and HPLC fingerprint of the refined by 50% ethanol ilar content of dry extract in tixed extract is significantly higher than individual extraction. Tain characteristic peak area in mixed extract ixed. Key i-bionic extraction；Glycyrrhetinic acid；Cinnamic acid；total flavones；volatile oil；HPLC fingerprint 桂枝甘草汤出自汉代张仲景的《伤寒论》,由桂枝、炙甘草组成,具有补心助阳、生阳化气、补阳扶中的功效。临床用于心率失常具有较好效果。有研究表明,桂枝甘草汤对环磷酰胺诱发的姐妹染色体互换及微核升高具有较强的抑制作用1-2。但目前桂枝甘草汤的应用仍以汤剂为主,.freelenex ODS3(5 μm,4.6 mm×150 mm)；SPD-10Avp紫外检测器；RE-52AA型旋转蒸发器(上海亚荣生化仪器厂)。 药材经鉴定,桂枝为樟科植物肉桂Cinnamomum cassia Presl的干燥嫩枝,甘草为豆科植物甘草Glycyrrhiza uralensis Fisch.的干燥根及根茎。炙甘草：取炼蜜,加适量开水稀释后,淋入净甘草片中拌匀,闷润,置炒制容器内,用文火加热,炒至老黄色,不粘手时取出,放凉(每100 kg甘草用炼蜜25 kg)。 甘草次酸、肉桂酸、柚皮苷对照品(中国药品生物制品检定所提供,批号分别为723-200109、710-200011、722-200107)；甲醇为色谱纯；水为三蒸水；其余试剂均为分析纯。 2 方法与结果 2.1 药材的组合方式 将桂枝、甘草排列组合成2组,即单煎混合组和混煎组。混煎组为桂枝、甘草合煎；单煎混合组为桂枝、甘草分别单煎后合并2种浓缩液。 2.2 提取液的制备 将处方药材分别粉碎,过10～20目筛,按处方比例(桂枝∶甘草＝2∶1)分别称取桂枝粗粉80 g、炙甘草粗粉40 g,按“2.1“项下组合方式,用SBE法分别提取3次(双提法：第1次用水用0.1 moL/L HCl调至pH为2.04,第2、3次用水用0.1 moL/L NaOH调至pH为7.25、8.51；加水量依次为药材重量的10、8、8倍；煎煮时间依次为190、95、45 min；双提法提取的挥发油单独存放),分别滤过,离心,合并上清液,水浴浓缩至400 mL。同法制备甘草、桂枝单煎液,即得(每1mL相当于原药材0.3 g)。 2.3 供试液的制备 精取提取液各10 mL,加水35 mL,缓缓加入盐酸4 mL,静置30 min,待气泡消失后,再加盐酸1 mL、氯仿30 mL,水浴加热回流1.5 h,放冷,移至分液漏斗中,静置,分取氯仿层,水层用氯仿萃取(20 mL×2),回收氯仿,残渣用无水乙醇定容至25 mL,得供试液A(每1mL相当于原药材0.12 g)。 精取提取液各15 mL,分别置蒸发皿中,加硅藻土4 g,拌匀,水浴蒸至近干,80 ℃烘干,研细,加乙酸乙酯40 mL,超声提取20 min,滤过,回收乙酸乙酯,残渣用甲醇定容至5 mL,得供试液B(每1mL相当于原药材0.9 g)。 精取提取液各15 mL,分别置蒸发皿中,加硅藻土4 g,拌匀,水浴至近干,80 ℃烘干,研细,用甲醇100 mL索氏回流5 h(提至无色),滤过,用甲醇定容至100 mL,得供试液C(每1 mL相当于原药材0.045 g)。 精取提取液各15 mL,分别置蒸发皿中,加硅藻土4 g,拌匀,水浴蒸至近干,80 ℃烘干,研细,用50%乙醇100 mL索氏回流4 h (提至无色),滤过,用甲醇定容至100 mL,得供试液D(每1 mL相当于原药材0.045 g)。 2.4 对照品溶液的制备 精密称取甘草次酸对照品1.70 mg,用无水乙醇配制成0.34 mg/mL的溶液。精密称取肉桂酸对照品2.20