正交实验优选常春油麻藤总黄酮提取工艺的研究论文.docVIP

　　正交实验优选常春油麻藤总黄酮提取工艺的研究论文 张凌 刘亚丽 饶志军 冯军 【摘要】 目的研究提取常春油麻藤中总黄酮的最佳工艺条件。方法以芦丁为指标，用NaNO2- Al(NO3)3-NaOH显色体系作为显色剂，用正交实验法对常春油麻藤总黄酮提取方法进行了系统研究。结果最佳提取工艺为30倍量60%乙醇回流3次，40 min/次，常春油麻藤中总黄酮的含量为12.43%。结论乙醇浓度、料液比、回流时间和提取次数对常春油麻藤总黄酮的提取均有影响。最佳提取工艺为A2B3D1C1。 【关键词】 常春油麻藤 总黄酮 芦丁 紫外分光光度法 正交实验 AbstractObjectiveTo study the optimum extraction technology of total flavonoids in Mucuna sempervirens Hemsl. MethodsUsing Rutin as the evaluating criteria and NaNO2- Al(NO3)3-NaOH as chromogenic agent, the extraction condition um extraction technology in, 3 times. The total flavonoids in Mucuna sempervirens Hemsl e and number of times have significant impact on extraction of total flavonoids in Mucuna sempervirens Hemsl. The optimum extraction technology is A2B3D1C1. Key pervirens Hemsl.; Total flavonoids; Rutin; UV; Orthogonal design 常春油麻藤，是丰城鸡血藤的一个品种，又名牛马藤或大血藤，是豆科植物常春油麻藤 Mucuna sempervirens Hemsl. 的藤茎。性温.freeleter(日本岛津公司)；电子分析天平（上海梅特勒-托利多仪器有限公司）；SB3200超声波清洗仪（上海博讯实业有限公司医疗设备厂）；DZF-6050型真空干燥箱（上海博讯实业有限公司医疗设备厂）；X-9146MBE数显鼓风干燥箱（上海博讯实业有限公司医疗设备厂）；HH-S数显恒温水浴锅（江苏省金坛市医疗仪器厂）；万能粉碎机（天津市泰斯特仪器有限公司）。 1.2 材料与试剂 芦丁对照品（中国药品生物制品检定所提供，批号：100080-200306）；常春油麻藤药材（采自于江西省南昌市湾里区梅岭山脉，由江西中医学院中药系赖学文老师采集并鉴定）；所用试剂均为分析纯。 2 方法与结果 2.1 总黄酮的测定方法 2.1.1 测定方法 依据在黄酮类化合物的紫外光谱图上主要有两个吸收带：环肉桂酰系统引起的吸收带Ⅰ（300～550 nm）和环苯酰系统引起的吸收带Ⅱ（240～280 nm）。若加入铝盐，则铝离子与黄酮化合物形成稳定的配合物，带Ⅱ会明显向长波方向移动（红移）；在NaNO2的强碱性溶液中，其在500～510 nm处吸光度值最大，从而为分光光度法测定提供了可靠的依据。 2.1.2 测定方法 取4个10 ml容量瓶，1，2号分别加入1 ml芦丁对照品溶液和1 ml稀释到一定倍数的常春油麻藤溶液，各加60%的乙醇稀释至刻度，以60%乙醇为空白，在紫外分光光度计上于200～760 nm波长范围内进行扫描。3，4号分别加入1 ml芦丁对照品溶液和1 ml稀释到与2号同样倍数的常春油麻藤溶液，加入0.15 ml 5% NaNO2溶液摇匀，放置6 min；加入0.15ml 10% Al(NO3)3溶液摇匀，放置6 min；加入4 ml 1 mol/L NaOH溶液摇匀，定容，放置0～15 min，用同样方法加入显色剂的溶剂作空白，在200～760 nm波长范围内扫描［2］，得出吸收光谱，结果见图1。 从图1可以看出，在未加显色剂以前，对照品在361 nm和257 nm处有最大吸收，供试品在282 nm处有最大吸收，加入NaNO2- Al(NO3)3-NaOH显色体系后，对照品和供试品的吸收峰都发生了红移，在502 nm处有最大吸收。因此，可以确定502 nm为测定波长。 2.1.3 对照品溶液的制备精密称取芦丁对照品19.84 mg，置于50 ml容量瓶中，加60%乙醇溶解（如不溶，置水浴上微热并短时超声使之溶解），用60%乙醇稀释至刻度，摇匀，即得芦丁对照品溶液（每毫升含芦丁0.992 mg）。 2.1.4 标准曲线的制备精密量取芦丁对照品溶液0，0.2，