正相硅胶-选择洗脱气相色谱法、液相色谱质谱法检测论文.docVIP

　　正相硅胶/选择洗脱气相色谱法、液相色谱质谱法检测论文 张金虎 林永辉 梁震 ,刘建军 【摘要】 以正相硅胶/选择洗脱为核心，建立了一种适用于各种复杂基质食品中甲胺磷残留分析的前处理方法。样品用无水Na2SO4配合乙酸乙酯均质研磨，超声波辅助提取，提取液经PSA粉末分散固相萃取和LCSi柱单一溶剂选择洗脱净化后，供气相色谱仪(GC)和超高效液相色谱串联质谱仪(UPLCMS/MS)分析。气相色谱采用火焰光度检测器(FPD)，液相色谱质谱联用采用电喷雾正离子方式(ESI+)，T3键合技术(HSS T3)和亲水作用(HILIC)超高效液相色谱柱分离，外标法定量。方法简便、快速.freelg/kg，回收率分别为73%～90%， 81%～96%，相对标准偏差分别为2.4%～6.1%， 5.2%～10.8%。并对选择洗脱净化过程中的作用机理进行了研究。 【关键词】 气相色谱法，超高效液相色谱串联质谱法，T3键合技术色谱，残留分析，甲胺磷 1 引 言 甲胺磷(Methamidophos)，是一种高效、广谱性有机磷杀虫剂和杀螨剂，曾是我国生产和使用量最大的农药1，虽然国家于2007年禁止其销售和使用，但违规现象屡禁不止，甲胺磷残留超标及食物中毒事件时有发生，使得检测甲胺磷残留问题成为人们关注的焦点。但甲胺磷残留检测技术一直被认为是农药残留检测技术中的难点之一，样品基质的复杂化程度直接影响到实验结果及成败1～6。 通过选择对干扰物质无响应的检测器，可以在一定程度上解决基质干扰的问题。但各种检测器都有它的弱点：FPD检测器在检测含硫基干扰物质(葱、蒜等)和加工过程中使用类似物质处理过的样品(干香菇等)时干扰严重，无法进行定性与定量分析;NPD检测器对自然界中普遍存在的含氮化合物有响应，结果易受干扰，而且响应值低、峰形拖尾严重，定性与定量分析困难;MS检测器检测甲胺磷时，由于保留时间短，所监测离子的分子量小，易受干扰，信噪比较低，分析复杂基质样品时信噪比很差，无法满足要求。而且，气相色谱检测时需要在衬管中气化，甲胺磷对衬管的洁净程度极其敏感。近年来，液相色谱质谱联用被用于检测甲胺磷，样品无需加热，不会分解，也不涉及衬管吸附，具有一定的优势。但在检测复杂基质样品3时，由于甲胺磷在普通反相色谱柱上基本无保留，大量共流出的杂质产生了严重的离子抑制(基质效应)，甚至无响应。 提高前处理的净化效果才是彻底解决甲胺磷问题的办法。本实验建立了一种甲胺磷残留分析的前处理新方法，选择各种复杂基质样品(黑胡椒粉、茶叶、干香菇、小麦、蒜、韭菜、姜、葱、烤鳗及黄鱼)及有代表性样品(菠菜、苹果)进行验证。由于食品中硫基干扰物质与农药性质极其相似，目前尚没有办法在前处理阶段将它们除去7,8，必须在制样时用微波或磷酸对样品进行处理，在实际检测中难以操作。本方法实现了农药与硫基干扰物质在前处理的分离，使葱蒜类样品中的甲胺磷残留检测在GCFPD上也能得到无干扰的色谱图。另外，本方法实现了各种不同基质样品中甲胺磷残留检测方法的统一。 本方法将1.8 μm填料的T3键合技术HSS T3、1.7 μm填料的亲水作用Hilic超高效液相色谱柱配合电喷雾串联质谱用于有机磷农药检测，解决了普通反相色谱柱死时间问题，关于有机磷农药在这两种新型液相色谱柱上的色谱行为尚未见文献报道。实验发现甲胺磷在LCSi固相萃取小柱上能够实现单一溶剂选择洗脱的现象，本实验对净化过程的作用机理进行了研究。 2 实验部分 2.1 仪器与试剂 7890A气相色谱仪，FPD检测器，HP5毛细管柱(30 m×0.32 mm， 0.25 μm， 美国Agilent公司);S/MS测试。 2.2.3 色谱质谱条件 气相色谱条件：载气为氮气(99.999%)，流速2.0 mL/min，尾吹流量60 mL/min; 氢气(99.999%)流量75 mL/min;空气流量100 mL/min。进样口温度220 ℃，进样量2 μL，不分流进样，检测器温度250 ℃。柱温程序：60 ℃(2 min) 15 ℃/min160 ℃ 30 ℃/min280 ℃(3 min)。 超高效液相色谱串联质谱条件：流动相A为水，流动相B为甲醇。梯度洗脱：0～1.8 min，90%A;1.8～2.0 min，90%～10%A，保持0.5 min;2.5～3.0 min，10%～90% A，保持0.5 min。流速0.2 mL/min， 柱温30 ℃， 进样量5 μL。 离子源： 电喷雾(ESI+)， 毛细管电压：1 kV，锥孔电压：25 V，碰撞电压： 15 V，二级锥孔电压：3 V，透镜电压：0.3 V，源温度：110 ℃，脱溶剂气温度：350 ℃，脱溶剂气流量：800 L/h，锥孔气流量：50 L/