ALT活性的测定.ppt

* * * 实验项目 ALT活性的测定 （URIT-800半自动生化分析仪） 一、临床意义 【参考值】：0～40U/L ALT是丙氨酸氨基转移酶，也叫谷丙转氨酶的缩写符号。正常情况下，该酶主要存在于肝细胞内，只要极少量被释放入血浆中。当组织发生病变时，细胞内ALT被大量释放入血，引起ALT活性增高。 是诊断肝功能的主要指标之一。 5、血清谷丙转氨酶活性测定是目前临床上诊断肝脏 疾病的一种重要方法，但不具有特异性。 ALT升高常见于： 1. 急性肝炎和中毒肝细胞坏死时显著增高。 2. 慢性肝炎、肝硬化及心肌梗死时中度增高。 3.阻塞性黄疸和胆道炎症时轻度增高。外科手术，早期妊娠时也有升高。 4. 生理性的升高如：过度劳累，剧烈运动、睡眠不好 油炸食品等。 二、实验目的 1．掌握测定ALT活性的原理、方法和临床意义。 2．掌握URIT-800半自动生化分析仪的使用。 三、实验原理 1. L-丙氨酸 + a-酮戊二酸 ALT 丙酮酸 + L-谷氨酸 2. 丙酮酸 + NADH + H+ LDH L-乳酸 + NAD+ 3. NADH的氧化速率与血清中ALT的活性成正比， 通过测定340nm处NADH的下降速率， 即可计算出ALT的活性(单位：U/L)。 四、实验器材与试剂 （1）试管 1支 （2）水浴箱 1台 （3）试管架 1个 （4）洗耳球 1个 （5）微量移液器 1支 （6）刻度吸量管（5ml） 1支 （7）半自动生化分析仪 1台 实验器材 （1）血清 （2）试剂 实验试剂 五、实验内容和操作过程 1、加样： 取1支干净试管，加1mL试剂,10mL血清，混合均匀。 2、测定： 在URIT-800半自动生化分析仪上（波长340nm） 测定血清ALT的活性。 3、记录 注意：加样后应迅速测定结果！ *