采用Agilent88008900串联四极杆.PDF

采用Agilent 8800/8900 串联四极杆 ICP-MS 通过capLC-ICP-MS 同时 测定多肽和磷酸肽 应用简报 蛋白组学 作者 1 Silvia Diez Fernández 、 2 Naoki Sugiyama 、 Jorge Ruiz Encinar1 和 Alfredo SanzMedel1 1 奥维耶多大学物理与分析化学学院 Julián Clavería 8, 33006 Oviedo, Spain 2 安捷伦科技公司，日本东京 摘要 结合毛细管液相色谱分离技术，Agilent 8800 串联四极杆ICP-MS 在MS/MS 质量 转移模式下可痕量测定磷酸肽中的磷与含硫多肽中的硫。使用LC-ICP-MS 可获得 前所未有的含硫和含磷物质的最低绝对检测限（分别为 11 fmol 和6.6 fmol ）。 硫的同位素比值测定结果与其理论值高度吻合，从而证明干扰得以有效消除。 所观测到的硫和磷的峰形和信噪比表现优异。测定结果表明串联四极杆capLC- ICP-MS 技术在使用非特殊标样测定含硫和含磷多肽的高灵敏度和同时绝对定量 分析方面有巨大潜力。 Agilent 8900 ICP-MS/MS 已得到验证 前言 较之传统的仪器或 ICP-QMS ，Agilent 8800/8900 在八极 杆反应池(ORS) 和四极杆质量过滤器(Q2) 前方配备了额外 LC-MS/MS 用于定量分析制药/生物制药和临床研究中的 的主四极杆质量过滤器(Q1)。在该串联质谱结构中，Q1 作 目标蛋白质。此方法常常使用同位素标记的合成蛋白质和 为单位质量过滤器仅允许目标分析物质量数的离子进入反应 多肽作为内标来定量分析相应的目标化合物。与之相反， 池，排除了所有其他离子。因为等离子体和基质中的离子被 LC-ICP-MS 通过测定目标化合物中含有的杂原子硫和磷对 Q1 排除，确保了即使在复杂高基质样品中，ORS 中的反应 蛋白质和多肽进行非特异性定量分析。通过这种方式可以 过程也能得到精确控制从而实现准确测量，并且灵敏度也得 使用含有杂原子的不同化合物，并将单个含杂原子的非蛋 到了极大的增强。色谱分离过程通过与8800 ICP-MS/MS 白质化合物作为通用标样对其进行定量。不幸的是，硫和 联用的安捷伦cap-LC 系统完成。 磷的检测限因其高电离能和传统四极杆 ICP-MS (ICP-QMS) 的多原子干扰而大打折扣—即使使用了碰撞 反应池 。 / (CRC) 实验 虽然扇形磁场高分辨 ICP-MS (HR-ICP-MS) 也被用于该 类应用，但迄今为止仍没有任何 ICP-MS 仪器能够达到 试剂和材料 已报道的 ESI-MS/MS 仪器使用同位素标记合成多肽时 超纯水（Millipore ，日本东京），HPLC 和分析试剂级乙腈 所具有的检测限（特别是对于硫）。表 1 列出了关于 LC- 以及甲酸（和光纯药工业株式会社，日本大阪）。ICP-MS