产学合作案结案报告书.PDF

產學合作案結案報告書 華生 96 產學字 001 號 混摻左旋維他命 C 之植物性蛋白水膠 面膜護膚保養品細胞毒性之評估 甲方：宏昇流通有限公司 乙方：中華技術學院 生物科技系 計劃主持人：饒文娟講師 一、計畫背景及目的 以科學方式評估市場不同公司的混摻左旋維他命 C 之植物性蛋白水膠面 膜護膚保養品細胞毒性與消費者接受度 之評估，並討論最適化混摻左旋 維他命 C之植物性蛋白水膠面膜護膚保養品加工原料條件。為瞭解混摻 左旋維他命 C 之植物性蛋白水膠面膜護膚保養品釋放性能的關係與消費 者接受度，混摻左旋維他命C 之 植物性蛋白水膠面膜釋放左旋維他命 C 性能及混摻左旋維他命 C之植物性蛋白水膠面膜護膚保養品的細胞毒性 在本研究中評估。 二、研究方法 1.文獻蒐集 利用碘滴定反應來計算水膠膜上之左旋維他命C 的含量及經材料萃取液 進行細胞的培養，觀察其細胞形態及生存活性上的變化，藉以評估試驗 物質是否具有細胞毒性。 2.護膚面膜購買與檢測 一、利用碘滴定反應來計算水膠膜上之左旋維他命 C的含量： 本實驗利用碘酸鉀溶液(KIO3)為滴定劑在酸性溶液中與碘化鉀(KI) 先反 應產生碘分子 (I2) ，如式： IO – ＋5 I – ＋ 6H＋ → 3 I ＋ 3H O 3 2 2 碘分子可與溶液中的維他命 C很快地進行氧化還原反應，如式： 當溶液中維他命 C 完全反應後，過量的I 與溶液中I –生成I – ，並和預先加 2 3 入的澱粉指示劑產生藍黑色錯合物而知達成滴定終點。再依據滴定劑IO3 – 之莫耳數及其與維他命C之化學計量關係，可算出水膠膜上維他命C的含 量。 二、經材料萃取液進行細胞的培養，觀察其細胞形態及生存活性上的變 化，藉以評估試驗物質是否具有細胞毒 性，測試方法如下，試驗物質的 萃取液置備： 2 (1)試驗物質：根據美國藥典的比例 120cm 膠( ) ：20ml培養液，然後放入 培養箱中 37℃，24 小時。 (2)陽性對照：利用利用培養基將 dimethylsulfoxide稀釋到 5%當作正對 照，同試驗物質萃取液置備方式。 試驗步驟：將濃度為 2×105cells/ml的纖維母細胞懸浮液，加到六孔盤，每 孔 2 ml ，放到培養箱中於37℃、5%CO 下培養 24 小時，使細胞成長為單 2 層的細胞層。吸去培養基，每孔滴入各組萃取液 2ml ，於37℃、5% CO 下 2 培養 48 小時。在 48 小時，觀察紀錄細胞型態及生長情形，以試劑組作 為依據，評分等級。細胞毒性判定系統(ISO 10993-5) 等級 細胞單層緻密度 細胞型態與陰性對照組比較 判定 0 100% 與試劑組比較無差異 無毒性 1 90~100% 輕微變化，不超過 20%的細胞成圓形 輕微毒性 2 60~90% 些微變化，不超過 50%的細胞成圓形 中度毒性 3 30~60% 明顯變化，不超過 70%的細胞成圓形 重度毒性 4 30% 嚴重變化，幾乎所有單層細胞皆破壞 嚴重毒性 三、完成之工作項目及成果 1.供最佳混摻左旋維他命 C之植物性蛋白水膠面膜，建立護膚面膜性能參 數與資料庫。由表示各混摻左旋維他命