华中师范大学分子病毒学课件.ppt

脊髓灰质炎 Methods for study of virus structure A. 分类单元（general taxonomic category ranking ）: order, families, subfamilies ,genus, species B. 命名（Nomenclature） Order: -----virales as end of name for one virus Family : -----viridae as end of name for one virus Subfamily:---- virinae as end of name for one virus Genus: ------virus as end of name for one virus C. International、standardized and acceptable by International Committee on Taxonomy of Viruses 第一章 复习要点 1. 病毒是一类特殊的微生物，与人们生活息息相关； 病毒的研究非常重要。病毒学的研究经历了几个阶段，经历一些重要的事件。 分子病毒学是近三四十年得到迅速发展，与分子生物学技术的发展分不开 病毒采用非系统多原则分等级的分类方法，ICTV是最权威的病毒分类机构。目前ICTV认定的病毒分类系统中，分类单元是目-科-属-种；根据Baltimore分类法（基因组核酸类型和基因组复制方式）将病毒分为8组 5 亚病毒属于不同于一般病毒的结构特殊的一类病毒，包括类病毒/卫星病毒（拟病毒）/朊 病毒 单克隆抗体制备 MonoclonalAntibodies 病毒学研究历史 三 病毒学研究方法的发展---导致病毒结构的揭示 （3）病毒超显微结构的研究（Ultra-structural） 物理方法----- 滤膜过滤法------1930S，不同尺寸滤膜过滤病毒测定病毒直径； 超速离心法------1960S，超速离心机测病毒沉降系数，纯化病毒样品； 分光光度计------测定核酸/蛋白比例和物理学性质； 电泳分析----------病毒蛋白和核酸分子组成 X-晶体衍射法-----病毒蛋白结构测定：1950S，TMV结构获得诺贝尔奖 NMR------大分子的原子结构（30-40kD) Differential centrifugation (差速离心）在浓缩不同制备纯化病毒粒子的过程中得到应用。 差速离心 病毒的原子结构图 （VIRAL CAPSOMERS） 球状病毒：由蛋白亚单位（Protein subunits）组装形成二十面体球状病毒外壳（viral capsid），内含核酸基因组 杆状病毒：由病毒亚单位组成外壳，内含基因组 The complete structures of many viruses, representative of many of the major groups, have now been determined at a resolution of a few angstroms (?). 浓核病毒与细小病毒 病毒学研究历史 三 病毒学研究方法的发展---导致病毒结构的揭示 （3）病毒超显微结构的研究（Ultr-astructural） 化学方法-----组分的组成，特性和相互作用 pH改变，蛋白变性剂----解离病毒组分，e.g. TMV. 表面蛋白标记(e.g. iodine)和解离----确定哪些蛋白在表面 交联剂---蛋白和核酸相互空间关系 电镜技术-----1939, 获得TMV 电镜照片 TEM--- Transelectron Microscopy SEM----Scanning Electron Microscopy Electron Microscopy（ Cryo- EM ,one of the most powerful methods currently available ） 电子显微镜，冷冻电镜 X-ray crystallography X射线晶体衍射 Nuclear magnetic resonance（NMR） 核磁共振 Bioinformatics 生物信息学 ElectronMicroscopy 电 镜 工 作 原 理 四---分子病毒学的发展 病毒学研究历史 分子生物学技术的发展催生促进了分子病毒学的研究和发展 分子病毒学的研究对分子生物学的发展也起到推动作用 1. 杂交技术（Hybridization Techni