柴胡疏肝散干预卒中后抑郁模型大鼠海马神经细胞凋亡的证治机理分析.pdfVIP

目 录 摘 要 1 前 言 4 材料与方法 5 1 实验材料 5 1.1 实验动物 5 1.2 饲料来源 5 1.3 主要药物和试剂 5 1.4 主要仪器设备 5 2 实验方法 5 2.1 实验大鼠的分组 5 2.2 PSD 大鼠模型的制备 6 3 指标观测方法 7 3.1 一般状况观察 7 3.2 局灶性脑缺血大鼠神经功能缺损评定 7 3.3 OFT 行为学评定 7 3.4 病理片制作 7 3.5 免疫组化法检测Bcl-xl 、Bcl-xs 蛋白表达 8 4 统计学方法 10 结 果 11 1 各组大鼠实验分组后体重同一性检验 11 2 各组大鼠死亡情况 11 3 卒中手术大鼠神经功能缺损情况结果 11 4 各组大鼠体重变化情况结果 11 5 OFT 行为学评定结果 12 6 造模实验结果总结 13 7 光镜观察大鼠海马组织形态 13 8 免疫组化结果分析 13 理论探讨 15 1 海马神经元凋亡与PSD 15 2 中医研究 16 3 现代医学研究 17 4 建立PSD 模型的选择 18 4.1 实验动物的选择 18 4.2 PSD 复合模型 19 5 柴胡疏肝散对大鼠海马神经细胞干预的影响 20 结 论 21 问题与展望 22 致 谢 23 参考文献 24 附 录 29 附录 1 H E 染色 29 附录2 免疫组化 30 附录3 综述 31 附录4 在校期间论文和科研情况 40 摘 要 摘 要 目的：研究 PSD 模型大鼠海马神经细胞的凋亡及柴胡疏肝散对 PSD 模型大 鼠海马神经细胞凋亡的影响，探索PSD 的发病机理及PSD 肝气郁结证与海马神 经细胞凋亡的相关性，进一步揭示本病证治机理。 方法：1、分组：健康雄性 SD 大鼠 100 只，将大鼠随机分为 3 组：柴胡疏肝 散组、PSD 模型组，每组各 40 只，正常对照组 20 只。2 、造模及给药：除正常 组外，其余 2 组先用线栓法制备局灶性脑缺血大鼠模型，并按 longa 5 评分标准 进行评分，手术 1 周后开始复合制备PSD 大鼠模型，同时柴胡疏肝散治疗组给予 中药灌胃21 天，PSD 模型组蒸馏水灌胃。造模期间给予称重及 OFT 行为学评定。 3 、指标观察：光镜观察海马组织病理形态及凋亡特征变化。4 、免疫组化法检测 大鼠海马组织Bcl-xl 及Bcl-xs 蛋白表达情况。 结果：1、实验大鼠经过神经缺损评分、体重变化、OFT 行为学测试等方法 检验，大多数大鼠出现了病灶对侧肢体不同程度功能障碍，术后 1 周肢体功能有 所恢复，复合造模 3 周后PSD 模型组大鼠多数出现精神萎靡，四肢活动减少，兴 趣缺乏，体重减轻，OFT 行为学分值降低，提示PSD 大鼠模型成功。2 、病理观 察：正常对照组：海马组织细胞排列较规则、紧密，细胞组织结构完整，界限清 楚，细胞核明显，核仁清晰，细胞膜较完整。PSD 模型组：海马组织神经细胞排 列紊乱，神经细胞脱失严重，细胞带不清楚，细胞周围组织疏松、水肿，可见细 胞凋亡后的空泡，多数胞核深染、固缩明显。柴胡疏肝散治疗组：海马组织神经 细胞排列不紧密，可见少量变性坏死细胞，部分胞核轻度固缩。3 、免疫组化分析： PSD 模型组与正常对照组比较，Bcl-xs 蛋白阳性表达升高，Bcl-xl 蛋白表达下降 （P0.01 ）；柴胡疏肝散治