RH血型鉴定幻灯片.pptVIP

项目二 血型与输血 任务二 Rh血型鉴定 第四节 Rh血型 概念 一、Rh血型抗原 抗原性强弱次序为DECce Rh阳性：含D抗原 Rh阴性：不含D抗原 亚型中，以Du最有临床意义，易被误定为Rh阴性。 二、Rh血型抗体 免疫性抗体： 抗D抗体最强，其次是抗c和抗E。 三、Rh血型的遗传和命名 四、Rh血型鉴定 是否含有D抗原 因Rh抗体多为不完全抗体，所以多采用酶介质、抗人球蛋白等试验方法。 （一）聚凝胺法 【原理】 聚凝胺：产生很多阳离子 低离子强度溶液：降低红细胞的Zate电位 红细胞表面含D抗原，与抗D抗体凝集 柠檬酸盐解聚液：消除聚凝胺的正电荷，使正常红细胞的非特异性凝集解散，而抗原抗体引起的凝集仍然存在 （二）酶介质法 【原理】 酶（木瓜酶、菠萝酶等）可破坏红细胞表面带负电荷的唾液酸，降低红细胞表面负电荷，使红细胞之间排斥力减小，红细胞间距缩小，在不完全抗体的作用下发生凝集。 （三）抗人球蛋白法 【原理】： 不完全IgG类抗D抗体,使红细胞致敏,加入经一定稀释的抗人球蛋白血清后,将致敏红细胞连接，发生肉眼可见的凝集。 实践操作 用PH6.8-7.2的生理盐水配制2-3%的红细胞悬液，洗涤1次 加入抗D抗体与红细胞悬液各一滴于玻璃试管中 混合并在室温下（18—25℃）15分钟. 离心15秒钟,观察结果. 出现凝集为阳性 不出现凝集为阴性,对于阴性结果应再做的DⅥ和弱D型的测试 注：该抗D抗体为 IgG/IgM单克隆鉴定抗体混合型，其中IgMAnti-D可直接凝结D阳性红细胞，除了D4型和弱D(亚D)的一部分。IgGAnti-D通过间接的抗蛋白测试方法凝结D4和低浓度的弱D(亚D). 五、Rh血型的临床意义 （一）Rh血型与输血 （二）Rh血型与新生儿溶血病 复习思考题 1、Rh血型中抗原性最强、临床意义又最大的抗原是： 2、因为Rh抗体多为 抗体，所以常采用 、 、 等方法。 3、Rh血型不合引起的新生儿溶血病的原因：Rh 的母亲孕育了Rh 胎儿后，胎儿红细胞可通过胎盘屏障进入母体的血循环中，刺激母体产生 ，该抗体 进入胎儿体内而发生新生儿溶血病。由于第一胎产生的抗体效价较低，一般对胎儿无明显影响。但第二胎时抗体效价增高，易引起新生儿溶血病。 复习思考题 4、木瓜酶可破坏红细胞表面带负电荷的 ，降低红细胞表面负电荷，使红细胞之间排斥力减低，红细胞间距 ，在不完全抗体的作用下发生凝集。 5、抗人球蛋白可与红细胞上结合的 结合，将致敏红细胞连接，发生 的凝集。 三、ABO血型抗体 （一）天然抗体 （二）免疫抗体 天然抗体与免疫抗体的鉴别 四、ABO血型的亚型 亚型：属同一血型抗原，但抗原结构和性能或抗原位点数不尽相同的情况 A型 ： A1 A1和A抗原，血清中含有抗B抗体 A2 只有A抗原，血清中含抗B和抗A1抗体 五、ABO血型的遗传 A和B为显性基因，O为隐性基因 举例： A B AO BO 任务一（第三节）ABO血型鉴定 一、标本的采集 柠檬酸钠抗凝剂 二、红细胞悬液的配制 1、洗涤： 2、配制2％～5％的红细胞悬液 5％红细胞悬液＝比容红细胞1滴＋生理盐水1ml 2％红细胞悬液＝比容红细胞1滴＋生理盐水2ml 三、标准血清要求 1、特异性 2、效价 3、亲和力 4、不含冷凝集素 5、不含补体，无任何污染 四、标准红细胞悬液的制备 五、ABO血型鉴定方法 正定型： 反定型： （一）试管法： （二）玻片法； （三）注意事项 1、严格查对 2、操作方法应按规定先加血清，再加红细胞悬液， 3、试验用器材应清洁干燥 4、玻片法勿将干涸的红细胞聚集误认为凝集 5、反定型一般不宜采用玻片法 6、试管法离心后应先观察上清有无溶血 对于工作人员1%的错误，病人就是100%的误诊！！ （一）试管法 1、正定型 取10mm×60mm试管3支，分别标明抗A、抗B、抗A＋B，用滴管加入相应的抗A、抗B、抗A＋B标准血清各1滴，再加入被检者5％红细胞盐水悬液1滴，轻轻混匀。 2、反定型 取同样试管3支，分别标明A、B、O红细胞，用滴管各加入被检者血清1滴，再分别加入A、B、O型5％标准红细胞悬液1滴，轻轻混匀。 3、立即以RCF177g（1000r/min）离心1分钟。 4、取出试管，先观察有无溶血，再轻弹