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临检血检类 仪器 教学重点： 传统仪器 — 生物显微镜 现代仪器 — 血液分析仪 现代仪器 — 尿液分析仪 教学重点： 传统仪器 — 生物显微镜 现代仪器 — 血液分析仪 现代仪器 — 尿液分析仪 重点1：显微镜原理 显微镜的成像原理 显微镜的主要光学技术参数 光学原理 重点1：显微镜原理 显微镜的成像原理 显微镜的主要光学技术参数 数值孔径 定义：数值孔径(numerical aperture, NA)又称镜口率， 指物镜前介质的折射率(n)和物镜孔径角(α)半数正 弦的乘积，与显微镜的分辨率成正比 分辨率 定义：分辨率是指显微镜分辨两个物点的最小间距， 显微镜的分辨间距越小，显微镜的分辨率就越 高，因此分辨率一般以分辨距离(d)来表示 放大率 定义：放大率(magnification)是指物镜放大率和目镜放大 率的乘积。 其他技术参数 焦深：又称景深。即用显微镜观察某一平面时，不仅位于平面上的各点可以看清楚，而且平面的上下一定厚度内的各点也能看清楚，这个厚度就是焦深。 焦深与总放大倍数及物镜的分辨率成反比关系 重点2：显微镜构造 显微镜的光学系统： 目镜 物镜 重点2：显微镜构造 显微镜的机械系统： 瞳距调节 屈光度调节 粗调松紧调节旋钮 聚光镜中心调节 孔径光栏调节 孔径光栏开度与图象 显微镜的维护 经常性的维护 显微镜的维护 使用中的维护 显微镜的维护 其他的注意事项 清洁工具 擦拭方法 教学重点： 传统仪器 — 生物显微镜 现代仪器 — 血液分析仪 现代仪器 — 尿液分析仪 检测参数缩写 重点1：基本原理 Coulter原理 白细胞计数和分类计数 1、血液先经稀释和溶血剂处理 溶血剂的作用: 使红细胞迅速溶解; 使白细胞的胞浆通过膜渗出,胞膜紧贴于胞核或颗粒周围; 经处理后的白细胞与自然体积无关,含有颗粒的粒细胞体积大于无颗粒的单核及淋巴细胞. 2、仪器将35-450fl的血细胞分为256个通道，每个通道为 1.64fl，根据细胞的大小分置于不同的通道中从而显示白 细胞的体积分布直方图。 白细胞按照体积可分为三群： 35-90fl：小细胞群,淋巴细胞为主; 90-160fl：中间细胞群,包括单核细胞,嗜酸性粒细胞, 嗜碱性粒细胞,幼稚细胞或白血病细胞; 135-450fl：大细胞群,主要为中性粒细胞. 红细胞计数 经稀释后的红细胞通过计数小孔时产生相应的脉冲，脉冲高低代表红细胞体积，脉冲数量为红细胞数，脉冲高度叠加换算为红细胞比积，(有的仪器先计算MCV再乘以红细胞数) 稀释血液中含有白细胞，因其比例较小，可忽略。但在白血病及严重感染患者并伴有严重贫血时，需去掉白细胞计数结果。 36~360fl， 256个通道，范围在50~200fl。 各项红细胞参数MCV，MCH，MCHC，根据仪器检测的红细胞数，红细胞比积和血红蛋白含量计算而来； RDW：红细胞体积分布宽度，反映红细胞大小不等的程度，通过统计近万个红细胞的数据求得，以RDW-CV和RDW-SD报告。 血小板测定 与红细胞在一个系统进行检测；当各种细胞所产生的脉冲数字化后，根据不同的阈值，分别计算血小板和红细胞数目 分别储存于64个通道，范围在2~30fl 根据血小板体积大小计算出血小板平均体积（MPV） 血红蛋白测定 加溶血剂后，血红蛋白释放，与转化剂结合形成血红蛋白衍生物,在特定波长下比色，用光电比色法求出血红蛋白含量。 ICSH推荐使用氰化高铁法。校正仪器须以HiCN值为标准，HiCN最大吸收峰在540nm。 由于氰化物的毒性，非氰化溶血剂（SDS）应用日益广泛。 光散射原理 容量,电导,光散射(VCS技术) 血细胞保持自然形态 V: 电阻抗原理测细胞体积大小 C: 高频电磁探针测量细胞内部结构,核质 比,细胞内的化学成分. S: 细胞表面光散射的特点,鉴别细胞内部 颗粒的构型和颗粒质量的区别 这种技术是Coulter公司推出的专有办法，应用VCS技术的血液细胞分析仪主要有MAXM、STKS、HMX等型号 采用阻抗、激光散色和荧光染色技术：主要应用在Sysmex研制和开发的SF-3000、SE-9000、SE-9500、XE-2100、XT-18