3-愈伤组织的培养.ppt

愈伤组织根发生 不定根发生 ? 　　 脱分化　 再分化 体细胞胚→ 发育为植株 外植体→愈伤→ 　　　　　　　　　　　　 具根茎的两极器官 → 植株　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 器官分化→ 单极器官→ 先茎后根→ 植株 　　　 先根后茎→ 植株 外植体脱分化与再分化形成完整植株的途径 愈伤组织分化不定芽 当归愈伤组织分化培养 豆瓣菜愈伤组织转化与植株再生 愈伤组织分化 二、影响器官分化的因素 1．培养材料 （1）遗传型（基因型）差异 （2）器官和组织类型 （3）个体发育年龄 2．培养基 激素对组织培养中器官的形成，起着重要而明显的作用。 外 植 体 ↓ 高浓度生长素（2,4-D） 脱 分 化 ↓ 愈伤组织 ↓ 高（细胞分裂素/生长素） 再 分 化 ↓ 形 成 芽 ↓ 低（细胞分裂素/生长素） 分 化 根 ↓ 完整植株? 激素控制器官分化模式图 3．培养的环境条件 （1）光照影响 光强：不需要强光。 光照时间：与光强有一定关系。 光质：蓝光促芽，红光促根形成。 （2）温度影响 第三节 试管苗的移栽 一、练苗（试管苗驯化） 1．驯化：植物从试管中的无菌条件到适应外部环境的过程。 2．驯化的两种变化 （1）从无菌条件、低照度、多湿环境向通常环境转变。 （2）从异养型向自养型转变。 二、驯化的步骤 （1）将培养瓶口提前几天打开，放在栽培环境中3～10天，以适应光、温、湿等条件。 （2）将苗取出前注入清水，搅随培养基，取苗，清水洗去培养基。 （3）种植：先在无菌沙中沙培，2～3周后再移栽花盆或大田中。 本节暂时结束 * * 第三章 愈伤组织的培养 愈伤组织诱导与继代培养 愈伤组织分化与植株再生 试管苗的移栽 第一节 愈伤组织的诱 导与继代培养 愈伤组织诱导 继代培养 愈伤组织 一、愈伤组织诱导 1．愈伤组织形成过程 从外植体到愈伤组织分为三个时期： (1) 起动期（起动期） (2) 分裂期 (3) 分化期（形成期） 分裂期中细胞的各种变化 2．愈伤组织形态学和组织学 （1）愈伤组织的形态学 ① 愈伤组织的生长 ② 愈伤组织的形态 （2）愈伤组织组织学 愈伤组织的形态 1. 愈伤组织形态 愈伤组织的颜色 * 分生组织结节：又称拟分生组织（meristemoid），指生长的愈伤组织中出现的类似分生组织的细胞群，即胚性细胞群。分生组织结节可分化产生芽、根、胚状体。 * 维管组织结节：指生长的愈伤组织中出现的由维管组织细胞组成的细胞团，是试管植株维管束的前身。 分生组织结节 分生组织结节 分生组织结节 维管组织结节 维管组织结节 3．影响愈伤组织形成的因素 ① 生理或机械隔离 ② 培养细胞的异质性 ③ 生长调节剂的影响 ④ 光线的影响 4．影响愈伤组织再分化的因素 主要因素包括两个： 生长素和蔗糖 （1）生长素的影响 生长调节剂中生长素对维管组织分化过程有显著影响。 例1，法国植物学家Camus（1949）最早将嫁接小营养芽实验 例2，Wetmore和Sorokin（1955）将洋丁香未分化的愈伤组织嫁接营养芽实验 例3，Jeffs和Northcote(1967)菜豆愈伤组织诱导分化实验 茎尖诱导洋丁香愈伤组织分化 （2）蔗糖的影响 生长素对维管组织分化所起的作用在很大程度上取决于糖的存在。 例如，洋丁香愈伤组织再分化实验(IAA 0.05mg/L): 蔗糖浓度 分化结果 1%时 少数木质部 2%时 木质部多，韧皮部少 2.5﹪～3.5%时 都能分化 4%时 韧皮部分化 结论： ① 激素对愈伤组织内维管组织分化有重要作用（特别是IAA）。 ② 蔗糖（1.5～3.5%）也有重要作用。 继代培养：又称传代培养，指由最初外植体上切下