LC-MS基本知识及应用.ppt

离子源 1.电感耦合等离子体离子化（icp） 由于该条件下化合物分子结构已经被破坏，所以仅适用于元素分析。 2.电子轰击电离（ei） 能提供有机化合物最丰富的结构信息，有较好的重现性，其裂解规律的研究也最为完善。 缺点在于不适用于难挥发和热稳定性差的样品。 3.化学电离（ci） 适合于色谱和质谱联用,低气压化学电离源可以在较低的温度下分析难挥发的样品，并能 使用难挥发的反应试剂，但是只能用于傅里叶变换质谱仪。 4.大气压电离源（api） 液质联用仪最常用的离子化方式。 常见的大气压电离源有三种：大气压电喷雾（ESI），大气压化学电离（APCI）和大气 压光致电离（APPI）。 由于大气压电离源是独立于高真空状态的质量分析器之外的，故不同大气压电离源之间 的切换非常方便。 5.基质辅助激光解吸离子化（maldi） 主要用于可达100000da质量的大分子分析，仅限于作为飞行时间分析器和FT-MS的离子源使用。特别适合蛋白质，多肽等大分子，可以直接从组织样品采集数据。 电喷雾VS大气压化学电离 电离机理：电喷雾采用离子蒸发，而APCI电离是高压放电发生了质子转移而生成[M＋H]+或[M-H]-离子。 样品流速：APCI源可从0.2到2 ml／min；而电喷雾源允许流量相对较小,一般为0.2-1 ml／min. 断裂程度：APCI源的探头处于高温，热不稳定的化合物会分解. 适用范围：电喷雾有利于分析极性大的小分子和生物大分子及其它分子量大的化合物，而APCI更适合于分析极性较小的化合物。 多电荷：APCI源不能生成一系列多电荷离子 多级质量分析 为什么使用 HPLC/MS/MS? 不需进行衍生化。 在单个分析中实现确认/定量。 在复杂/很脏的基体中的低检测限 第一类仪器利用质谱在空间中的顺序，是由两台质谱仪串联组装而成。即前面列出的串列式多级质谱仪。 第二类利用了一个质谱仪时间顺序上的离子储存能力，由具有存储离子的分析器组成，如离子回旋共振仪（ICR）和离子阱质谱仪。但不能进行母离子扫描或中性丢失。  质量分析器的性能特点 QqQ 具体应用 011杂质-LCMS谱图 杂质的可能结构式 THANK YOU! 最大烷基丢失规律 分子离子或其他离子以同一种裂解方式进行时，总是失去较大基团的裂解过程占优势，形成的产物离子丰度较大。 2-已酮在进行a-裂解时，丢失丁基自由基产生100%的CH3CO+，而丢失甲基产生C4H9CO+的丰度只有2%。 常见低质荷比碎片离子 3、重排断裂 麦氏重排（Mclafferty rearrangement) 麦氏重排条件： 含有C=O， C=N，C=S及碳碳双键 与双键相连的链上有?碳，并在? 碳有H原子（?氢） 六圆环过度，H ? 转移到杂原子上，同时? 键发生断裂，生成一个中性分子和一个自由基阳离子 The MS data (only one peak, no other new peak!) and the HPLC data showed, the impurity 5 exist in the final product. 多极质谱是基于以下的事件。离子源从样品中制造离子。选择母离子，母离子发生碎裂。测量碎片离子。 对于需要不想最使用传统GC分析的人来说，使用LC/MS/MS具有吸引力。首先，不需要衍生化步骤，因为化合物要么在溶液中电离，这是可使用电喷雾电离，要么具有挥发性，可使用大气压化学电离。 LC/MS/MS的另外一个优点是可使用在线固相萃取，所以药品可以直接从基体中分离进入分析柱。 如上，你将发现现在所用的质谱分析器表现的比较。 为了使用四极杆进行多级质量分析，需要按顺序摆放三个四极杆。每个四极杆有独立的功能 :第一个四极杆 (Q1) 用于扫描目前的质荷比范围，选择需要的离子。第二个四极杆 (Q2), 也被称为碰撞池，它集中和传输离子，并在所选择的离子的飞行路径引入碰撞气体（氩气或氦气）。第三个四极杆 (Q3)用于分析在碰撞池（Q2）产生的碎片离子。 基础知识 优点： 灵敏度高，10-7—10-8g,单离子检测可达10-12g 快速，几分甚至几秒 测定分子量，确定分子式 分析范围广，便于混合物分析 新的电离、检测技术 局限性: (1)异构体，立体化学方面区分能力差。 (2