上课用DNA重组技术的基本工具课件.ppt

资料分析 此转基因实验实现了哪种生物的哪些性状在另外哪种生物中表达？ 性状的表达与我们从前学过的什么过程有关？ 要实现药物基因在烟草中的表达，要提前做哪些关键工作? 基因的剪刀（分子手术刀） 基因的针线（分子缝合针） 基因的运输工具（分子运输车） ①分布：主要在原核生物中。 性， 识别双链DNA分子的 核苷酸序列，切割 切点。 专一性，识别双链DNA分子的特定核苷酸序列，切割特定切点。 限制性内切酶作用过程 限制酶的识别特点 以中轴线双侧的DNA上碱基呈反向对称，重复排列 产生黏性未端和平末端 ①DNA连接酶作用的部位? 磷酸和脱氧核糖之间的键： 磷酸二酯键 磷酸和脱氧核糖之间的键： 磷酸二酯键 将外源基因送入受体细胞。 1、重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、连接酶和运载体。 （ ） 2、限制酶的切口一定是GAATTC碱基序列。 （ ） 3、一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列。 （ ） 科学家们经过多年努力，创立了一种新兴生物技术——基因工程，实施该工程的最终目的： （ ） A.定向提取生物体的DNA分子 B.定向地对DNA分子进行“剪切” C.在生物体外对DNA分子进行改造 D.定向地改造生物的遗传性状 在基因工程中，切割运载体和含有目的基因的DNA片段，需使用（ ） 同种限制酶 B.两种限制酶 同种连接酶 D.两种连接酶 GAA TTC CCC GGG CTT AAG CCC GGG ③作用的结果是什么？ ④举例： EcoR1限制酶、Sma1限制酶??? GAATTC CTTAAG CCCGGG GGGCCC 一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并在特定的切割点上将DNA分子切断。目前已发现的限制酶有200多种。 如果把两种来源不同的DNA用同一种限制酶来切割，会怎样呢？ 会产生相同的黏性末端，然后让两者的黏性末端黏合起来，就似乎可以合成重组的DNA分子了。 基因的针线：DNA连接酶 G A A T T C C T T A A G G A A T T C C T T A A G G C T T A A A A T T C G G C T T A A A A T T C G G C T T A A A A T T C G 同种限制酶切割 作用部位： 是磷酸二酯键（扶手） 不是氢键（梯子） DNA连接酶将两条DNA链连接起来的酶。 与DNA聚合酶 作用相同吗？ ①连接的部位： A T G C A T G C 连接酶连接磷酸二酯键 DNA连接酶的作用过程： 靶序列 靶序列 引物Ⅰ 引物Ⅱ 5’ 3’ 5’ 5’ 3’ 5’ 3’ 3’ Taq DNA 聚合酶 DNA连接酶和DNA聚合酶都是形成磷酸二酯键 多聚酶链式反应扩增DNA片段 二者在来源和 功能上的区别 ①连接的部位： ②结果： ③举例： E·coli DNA连接酶 T4 DNA连接酶 ?? 将互补配对的两个黏性末端连接起来，使之成为一个完整的DNA分子。 重组DNA分子 （外源基因） ？如何将外源基因送入受体细胞呢？ C T T A A G A A T T C G 基因进入受体细胞的载体? 　　 要让一个从甲生物细胞内取出来的基因在乙生物体内进行表达，首先得将这个基因送到乙生物的细胞内去！ ①作用 ②种类： 能将外源基因送入细胞的工具就是运载体。 质粒、噬菌体和动植物病毒。 作为基因工程的载体需要怎样的条件呢？ 议一议 2、能否用霍乱弧菌的质粒作为基因载体？ 3、作为载体，若没有切割位点将怎样？ 4、携带目的基因的载体是否进入了受体细胞，如何鉴定？ 5、假如目的基因导入受体细胞后不能复制，将怎样？ 1、从化学组成来看，载体应含有什么成分？ 双链DNA 不能，对宿主细胞有害 不能进行DNA的重组 载体上应有标记基因 可能造成基因丢失 （3）作为载体的必要条件 1.能自我复制 能进入受体生物细胞并在受体生物细胞内复制并表达； 2.有一个至多个限制酶切位点 能与目的基因结合 3.有遗传标记基因 便于