Agilent1100HPLC操作步骤.doc

Agilent1100高压液相色谱仪基本操作步骤?一)、开机：1、打开计算机,进入Windows NT （或Windows 2000）画面,并运行Bootp Server程序。2、打开 1100 LC 各模块电源。3、待各模块自检完成后，双击Instrument 1 Online图标，化学工作站自动与1100LC通讯，进入的工作站画面。4、从“View”菜单中选择“Method and Run control”画面, 单击”View”菜单中的“Show Top Toolbar”，“Show status toolbar”，“System diagram”,”Sampling diagram”，使其命令前有“√”标志，来调用所需的界面。5、把流动相放入溶剂瓶中。6、打开Purge阀。7、单击Pump图标，出现参数设定菜单，单击Setup pump选项，进入泵编辑画面。8 、设Flow：5ml/min，单击OK。9、单击Pump图标，出现参数设定菜单，单击Pump control选项，选中On，单击OK，则系统开始Purge，直到管线内（由溶剂瓶到泵入口）无气泡为止,切换通道继续Purge，直到所有要用通道无气泡为止。10、单击Pump图标，出现参数设定菜单，单击Pump Control选项，选中Off，单击Ok关泵， 关闭Purge valve。11、单击Pump图标，出现参数设定菜单，单击Setup pump选项，进入Pump编辑画面，设Flow：1.0ml/min。12、单击泵下面的瓶图标，输入溶剂的实际体积和瓶体积。也可输入停泵的体积。单击Ok。（二）数据采集方法编辑：1、开始编辑完整方法：●从“Method”菜单中选择“Edit entire method” 项，如上图所示选中除“Data analysis ”外的三项，Ok，进入下一画面。2、方法信息：●在“Method Comments”中加入方法的信息（如：方法的用途等）。●单击Ok 进入下一画面。3、泵参数设定：（以二元泵为例）●在“Flow”处输入流量,如1ml/min，在“Solvent B”处输入70.0,(A=100-B) ,也可Insert 一行”Timetable” ,编辑梯度。 在“Pressure Limits Max”处输入柱子的最大耐高压，以保护柱子。Ok进入下一画面。4、自动进样器参数设定:, 进样体积 1.0ul ,洗瓶位置为6号。“Standard Injection”----只能输入进样体积，此方式无洗针功能。“Injection with Needle Wash”----可以输入进样体积和洗瓶位置，此方式针从样品瓶抽完样品后，会在洗瓶中洗针。“Use injector program”---可以点击Edit ●点击Ok进入下一画面。5、柱温箱参数设定:●在”Temperature”下面的方框内输入所需温度,并选中它,点击”more” 键,如图所示,选中”Same as left”---使柱温箱的温度左右一致。●点击ok进入下一画面。6、VWD检测器参数设定:●在”Wavelength”下方的空白处输入所需的检测波长,如254nm, Peak width (Response time)”下方点击下拉式三角框,选择合适的响应时间, 如0.1min (2s)。●在Timetable 中可以“Insert”一行，输入随时间切换的波长，如1min ，波长=300nm。 点击ok进入下一画面。7、DAD检测器参数设定:: 254nm,BW=30nm, 参比波长=350nm,BW=100nm; ●检测波长：一般选择最大吸收处的波长。 样品带宽BW： *近样品信号的无吸收或低吸收区域。参比带宽BW：至少要与样品信号的带宽相等，许多情况下用100nm作为缺省值。Peak width（Response time）：其值尽可能接近要测的窄峰峰宽。Slit—狭缝窄，光谱分辨率高；宽时，噪音低。同时可以输入采集光谱方式，步长，范围，阈值。选中所用的灯。Ok进入下一画面。8、RID检测器参数设定:: 进样体积: 20ul 。 光学单元温度: Off 。 : 正 。 峰宽(响应时间) : 4s ●“Optical Unit Temperature”---若环境温度控制在±2℃,设定为Off, 若环境温度不稳定,则设定光学单元温度为高于环境温度5度,以防样品在池中沉淀。“Peak width”---大多数分析设为4S，只有在高速分析下设为更短。 “Automatic recycling after an