丙肝实验室检测20160615.ppt

丙型肝炎实验室检测策略 病原学 病原—丙型肝炎病毒（HCV） HCV 的特性 黄病毒科 有包膜 单股正链 RNA 病毒(9.6 kb) 3000 氨基酸组成的多聚蛋白 病毒基因组具有高度变异性 增殖速度快，每日复制量：10 兆 (1012) 病毒颗粒 结合 囊泡融合与病毒释放 RNA 复制 正链 负链 翻译与多肽链加工 脱壳 与膜融合 病毒装配与成熟 胞饮作用 HCV 生活周期 Davis GL et al. Semin Liver Dis. 1999;19(suppl 1):103-112. HCV、HIV的比较 HCV HIV 病毒类型 RNA病毒 （黄病毒科） RNA病毒 （逆转录病毒科） 血液传播 血液水平传播为主,输血制品、静脉吸毒、不洁注射、性乱、纹身美容等 血液水平传播为主 性乱、输血制品、静脉吸毒、不洁注射、 母婴传播 少见 可见 抗体 无保护作用 无保护作用 预防 目前无疫苗 目前无疫苗 HBV 和 HCV 特点比较 HBV 双链 DNA 病毒 嗜肝 DNA 病毒科 4 个开放读框 高病毒血症 高感染性 与宿主基因整合 无细胞毒性 HCV 单链 RNA 病毒 黄病毒科 1 个开放读框 低病毒血症 低感染性 不与宿主基因整合 细胞毒性 (?) HCV基因型 分为6个主要基因型及不同亚型 命名：以阿拉伯数字表示HCV的基因型，以小写的英文字母表示亚型（如1a、2b） 基因1-3型呈全球性分布 欧美和亚洲1和2型为主，东南亚为3型，中东为4型，南非5和6型为主 我国以1b、2a型为主 丙型肝炎病毒基因分型 1a, 1b 2a, 2b, 3a 1a, 1b 2a, 2b, 2c, 3a 4 5a 1b 1b, 6 1b, 3a 1b, 3a 3b 4 Clinical Microbiology Reviews, 2000, 13(2) 223-235 HCV 1b和2a型是我国主要流行型 1a, 1b, 2b, 3a 2a HCV 感染的自然史 HCV 感染的自然史 HCV急性感染痊愈的血清学特征 HCV急性感染进展为慢性感染的血清学特征 HCV实验室检测技术规范 第一章 丙型肝炎病毒 第二章 丙型肝炎病毒抗体检测 第三章 丙型肝炎病毒抗原检测 第四章 丙型肝炎病毒核酸检测 第五章 丙型肝炎病毒基因型检测 第六章 丙型肝炎病毒细胞培养 第七章 实验样品的采集、保存、运输 第八章 丙型肝炎病毒检测实验室的室内质量控制及能力验证 第九章 实验室生物安全 丙型肝炎病毒抗体检测 筛查试验：酶联免疫吸附试验、胶体金法快速试验、化学发光试验、免疫荧光试验 补充试验 :重组免疫印迹（RIBA) 蛋白印迹试验 丙型肝炎病毒抗原检测 目前采用双抗体夹心ELISA 定性或定量检测样品中游离的HCV核心抗原或总核心抗原 丙型肝炎病毒核酸检测 HCV RNA定性检测：血液筛查、发现窗口期感染 HCV RNA定量检测：判断抗病毒治疗疗效 实时荧光定量PCR、b-DNA技术 丙型肝炎病毒检测策略 诊断 ：确定个体HCV感染状况 血液筛查 ：防止输血传播HCV 监测 ：了解人群HCV感染率及变化趋势 筛查试剂 样品 阴性反应 初筛试验 阳性反应 复检试验 均阴性反应 一阴一阳 均阳性反应 补充试验 原有试剂双孔或原有试剂加另一种不同原理（或厂家）试剂 报告阴性 图 临床诊断筛查检测流程 复检阳性样品 阳性反应 免疫印迹试验 阴性反应 报告阴性 图 HCV临床诊断补充试验检测方法一流程 可疑 报告可疑 报告阳性