2016NSCLC靶向诊断治疗进展研究.ppt

EGFR少见突变小结 常见突变19 deletion 和L858R 占EGFR突变的90%，少见突变约占10% 少见突变中G719X，L861Q和S768较为常见（6~7%），对EGFR-TKI治疗也较敏感，第二代TKI疗效更优。 Afatinib对T790M突变合并少见突变和20外显子插入突变的疗效较差，ORR约为15%和10%，PFS约2~3月 ALK融合基因 ALK融合基因 2007年，日本学者Soda等通过cDNA文库筛选在肺癌中发现棘皮动物微管样蛋白4-间变淋巴瘤激酶(EML4-ALK)融合基因，这是继EGFR、k-ras基因之后在NSCLC中新发现的具有靶向药物的肿瘤生物标志。 在同一肿瘤标本中EML4-ALK融合基因可存在多种融合方式，提示EML4-ALK融合基因存在序列的多样性与复杂性。 目前针对EML4-ALK融合基因的检测方法主要有荧光原位杂交(FISH)、免疫组织化学(IHC)及基于PCR的分析技术。 ALK融合基因 ALK融合活化可致细胞恶性转化，临床 研究表明肿瘤标本中检测到含有EML4-ALK的NSCLC患者可从ALK特异性激酶抑制剂克唑替尼中获益，显著延长患者的总生存期。 ALK重排不是一个有利的预后因素 ALK融合基因 克唑替尼治疗的患者1年内易发生获得性耐药，有研究报道ALK TK结构域的L1196M、C1156Y位点突变与EML4-ALK融合变异肺癌患者服用克唑替尼治疗后的耐药相关。 热休克蛋白(HSP)HSP90抑制剂能快速降低患者肿瘤组织中EML4-ALK的水平而缓解肿瘤的进展，并且发现在使用ALK抑制剂克唑替尼后获得性耐药的患者再用第2代的ALK抑制剂或者 HSP90抑制剂治疗是有效的 ALK融合基因 针对ALK变异型肺癌的个体化治疗正在不断发展，不同的融合方式产生的酪氨酸激酶活性不同，导致从ALK-TKI中获益的程度可能不同 ALK融合基因的临床特征明显存在于腺癌、不吸烟、年轻患者的肿瘤样本中，且印戒细胞癌中多见。 克唑替尼是ALK、ROS1、MET络氨酸激酶抑制剂 色瑞替尼用于治疗疾病进展或不耐受克唑替尼的ALK阳性转移性NSCLC ALK重排和EGFR突变通常相互排斥。 其他少见突变基因的诊断治疗 ROS1重排 人类ROS1基因是胰岛素受体家族的一种跨膜酪氨酸激酶，与禽流感肉瘤病毒UR2的v-ros序列具有同源性 ROS1属于受体络氨酸激酶家族，位于6号染色体长臂16—22区，当发生基因重排时，ROS1高表达，可激活下游信号传导通路包括STAT3、PI3K和MAPK等通路。 两项大型的研究共筛查2000例的NSCLC患者，发现ROS1重排发生率为1%—2%。 ROS1重排 目前ROS1检测手段主要有FISH、RT-PCR、IHC，但尚无公认的伴随诊断方法。 FISH可识别所有类型的ROS1重排，灵敏度和特异度均较高，但也存在一些问题，无论是检测费用，还是对操作技术及检测结果的判读的要求都比较高，此外FISH筛查不能鉴别融合基因的具体融合变体。 RT-PCR具有可明确融合型、所需组织量极少等优点 IHC具有操作简单，价格低廉等优点，但其检测的准确性依赖于蛋白表达量及相应抗体的敏感性和特异性。 ROS1重排 ROS1融合基因是克唑替尼的有效作用靶点，临床试验表明克唑替尼对ROS1重排NSCLC具有高活性，ORR达72%；尽管克唑替尼对ROS1阳性NSCLC敏感，但仍无法避免耐药的产生。 ROS1克唑替尼耐药机制包括ROS1络氨酸激酶突变（ ROS1 G2032，L2155S突变），EGFR激活及上游皮间充质转化，近期又发现新的克唑替尼耐药突变位点D2033N。 MET扩增 C-MET也是络氨酸激酶受体家族成员之一，由原癌基因MET编码，位于7号染色体q31区，当c-MET与其配体HGF结合后，络氨酸残基自身磷酸化，激活细胞内多种信号通路，如PI3K、MAPK及STAT等通路，与肿瘤的增殖、转移、侵袭、血管形成、EMT等有关。 NSCLC中MET异常包括HGF或HGFR/c-MET 过表达，基因扩增在内的基因拷贝数增加及基因突变，外显子选择性剪切。 MET扩增 约25%的NSCLC存在MET蛋白的过表达，约2%-4%的NSCLC存在MET扩增，与预后不良有关。此外MET扩增是EGFR敏感突变的NSCLC患者对EGFR-TKI产生获得性耐药的主要原因之一。 在EGFR突变的EGFR-TKI获得性耐药NSCLC患者中，约5%-25%的患者存在MET扩增。 MET扩增 研究发现HGF、c-MET在NSCLC中高表达，且在腺癌中高于鳞癌。 另有研究表明c-MET基因拷贝数在不同的组织类型中均不同，其中低分化腺癌中c-MET的阳性表达率和c-MET拷贝数均较