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4、海藻酸钠溶液与酵母细胞混合 将溶化好的海藻酸钠溶液冷却至室温,加入已活化的醉母细胞,充分搅拌,使其混合均匀,再转移至注射器中。 为什么海藻酸钠溶液要冷却? 5、固定化酵母细胞 以恒定的速度缓慢地将注射器中的溶液滴加到配制好的CaCl2溶液中,观察液滴在CaCl2溶液中形成凝胶珠的情形将这些凝胶珠在CaCl2溶液中浸泡30 min左右。 加热使海藻酸钠溶化是操作中最重要的一环 海藻酸钠的浓度涉及到固定化细胞的质量。 浓度过高:很难形成凝胶珠,不是圆形或椭圆形; 浓度过低:凝胶珠颜色过浅、呈白色,包埋的酵 母细胞的数目少,影响实验效果。 应当注意什么问题? 刚形成的凝胶珠应在CaCl2溶液中浸泡一段时间,以便形成稳定的结构。 检验凝胶珠的质量是否合格,可以使用下列方法: 一是用镊子夹起一个凝胶珠放在桌上用手挤压,如果凝胶珠不容易破裂,没有液体流出,就表明凝胶珠的制作成功。 二是在实验桌上用力摔打凝胶珠,如果凝胶珠很容易弹起,也能表明制备的凝胶珠是成功的。 (二)用固定化细胞发酵 1、将固定好的酵母细胞(凝胶珠)用蒸馏水冲洗2-3次。 2、 将150mL质量分数为10% 的葡萄糖溶液转移到200mL的锥 形瓶中,再加入固定好的酵母细 胞,置于25℃下发酵24h。 这一阶段成功与否呢?怎样评价? 观察发酵的葡萄糖溶液;利用固定的酵母细胞发酵产生酒精,可以看到产生了很多气泡,同时会闻到酒味。 还有其他方法吗? 类型 优点 不足 直接使用酶 催化效率高,低耗能、低污染等。 对环境条件非常敏感,容易失活;溶液中的酶很难回收,不能被再次利用,提高了生产成本;反应后酶会混在产物中,可能影响产品质量。 固定化酶 酶既能与反应物接触,又能与产物分离,同时,固定在载体上的酶还可以被反复利用。 一种酶只能催化一种化学反应,而在生产实践中,很多产物的形成都通过一系列的酶促反应才能得到的。 固定化细胞 成本低,操作更容易。 固定后的酶或细胞与反应物不容易接近,可能导致反应效果下降等。 1.制备固定化酵母细胞的过程中错误的是( ) A.取干酵母,加入蒸馏水,使其活化 B.配制海藻酸钠时,加热用大火,直到海藻酸钠溶化为止 C.将溶化好的海藻酸钠溶液冷却至室温,加入已活化的酵母细胞 D.将凝胶珠在CaCl2溶液中浸泡30 min左右 B 随学随练 2.下列叙述不正确的是( ) A.从操作角度来考虑,固定化细胞比固定化酶容易 B.固定化细胞比固定化酶对酶的活性影响更小 C.固定化细胞固定的是一种酶 D.将微生物的发酵过程变成连续的酶反应应选择固定化细胞技术 C 3.下列说法不正确的是( ) A.葡萄糖与固定化葡萄糖异构酶接触,转化成的是果糖 B.从固定化酶反应柱下端流出的是果糖 C.高果糖浆不会像蔗糖那样诱发肥胖、糖尿病、龋齿和心血管病 D.酶溶解于葡萄糖溶液,可以从糖浆中回收 D 随学随练 4.使用固定化细胞的优点是( )。 A.能催化大分子物质的水解 B.可催化一系列化学反应 C.与反应物易接近 D.有利于酶在细胞外发挥作用 B 随学随练 5.如果反应物是大分子物质,采用那种方法催化受限制( )。 A.直接使用酶 B.使用化学方法结合的酶 C.使用固定化细胞 D.使用物理吸附法固定的酶 C 6、下列关于酶和细胞的固定叙述不正确的是( )。 A.酶分子很小,易采用包埋法 B.酶分子很小,易采用化学结合或物理吸附法固定的酶 C.细胞个大,难被吸附或结合 D.细胞易采用包埋法固定 A 7. 关于固定化酶的叙述不正确的是 ( )。 A.既能与反应物接触,又能与反应物分离 B.固定在载体上的酶可被反复利用 C.可催化一系列反应 D.酶的活性和稳定性受到限制 C 模板来自于 * 活性干酵母是由特殊培养的鲜酵母经压榨干燥脱水后仍保持强的发酵能力的干酵母制品。 将压榨酵母挤压成细条状或小球状,利用低湿度的循环空气经流化床连续干燥,使最终发酵水分达8%左右,并保持酵母的发酵能力。 * 海藻酸钠遇到钙离子可迅速发生离子交换.生成 凝胶.利用这种性质.将海藻酸钠溶液滴人含有钙离子的水溶液中可产生海藻酸钙胶球. 将酵母细胞与海藻酸钠溶液混匀后.通过注射器或相似的滴注器将上述混合液滴入CaCl: 溶液中.Ca2+从外部扩散进入海藻酸钠与细胞混合液珠内,使海藻酸钠转变为不溶于水的海藻酸钙凝胶,由此将酵母细胞包埋在其中
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