4 1高效液相色谱法概述.ppt

第四章高效液相色谱法和超临界流体色谱法 4.1.1 高效液相色谱法的特性 4.1.2 LC 与 GC的对比 4.1.1 高效液相色谱法的特性 液相色谱仪 4.1.2 LC 与 GC的对比 3. 两者的差异 4. 液相色谱的特殊性 （2）传质速率慢 （3）柱外效应影响显著峰展宽 请选择内容 第一节高效液相色谱的特性 High performance liquid chromatography and Supercritical fluid chromatography Feature and instrument of HPLC 特点：高压、高效、高速、高灵敏 高沸点、热不稳定有机及生化试样的高效分离分析方法。 LC＜＞GC 互补性 1.LC 和 GC 的共性 色谱基本理论、基本关系式及定性定量方法对于高效液相色谱同样适用。 影响柱效的因素同样为涡流扩散、分子扩散及传质阻力三项。 2. 两者具有很大的互补性 互补性：低沸点—高沸点。 扩 展：生化试样、手性化合物、离子化合物。 液相色谱中采用液体作为流动相。 液体与气体间的差异，也带来一些特殊问题。 气体与液体物理性质对比 分子在液体中的扩散系数要比在气体中的小4～5个数量级 ，产生什么结果？ (1) 纵向扩散对色谱峰扩展影响很小 流动相的线速率0.5 cm·s-1，分子扩散项的影响可以忽略，液相色谱中H-u曲线中的最佳流速值比气相色谱小得多。 固定相的微孔小且深时，扩散不易进行，传质速率慢，对色谱峰的扩展影响较大。 固定相颗粒越小，传质过程越快，柱效越高； 减小固定相的颗粒粒度和增大孔径是提高柱效的主要手段。 现代高效液相色谱的柱填料粒径都小于10μm。 不同粒径ODS填料对液相色谱H-u曲线影响 。 柱外因素：柱前峰展宽和柱后峰展宽。 柱前峰展宽：由进样及进样器到色谱柱连接管引起的（柱头直接进样，色谱峰的不对称性和柱效有明显改善）。 柱后峰展宽：柱后连接管和检测器死体积； 通用紫外检测器的池体积仅为8μL。 结束 4.1 高效液相色谱法的特性 4.2 液相色谱仪 4.3 液相色谱固定相与流动相 4.4 液相色谱中的主要分离类型 4.5 液相色谱分析条件的选择 4.6 高效液相色谱法的应用 4.7 离子色谱法 4.8 超临界流体色谱法 * *