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8.4.3 颜色反应;;亚硝酰铁氰化钠试剂（Legal反应） 操作：样品1～2mg，溶在2～3滴吡啶中，加1滴3％亚硝酰铁氰化钠溶液和1滴2mol/L的NaOH溶液，反应液呈深红色并渐渐褪去。 机制：;2、作用于甾体母核的反应 ; 反应名称;乙酐浓硫酸反应(Liebermann-Burchard反应)： 操作： 样品溶于冰醋酸，加浓硫酸-乙酐(1:20)，反应液呈黄 红 蓝 紫 绿等变化，最后褪色。 特点： 呈色变化过程随分子中双键的数目与位置不同而有所差异。;三氯乙酸-氯胺T反应(chloramine T反应) 操作： 样品醇溶液点在滤纸(或薄层板上)，喷以三氯乙酸-氯胺T试剂，纸片干后，100℃加热数分钟，紫外光下观察。 特点： 可利用这一试剂区别洋地黄强心苷的各类苷元。 ;假泅几奔襄坦矮拧施双致雁挤扔炔踊咨床驭顾惟面蝎野迸慈汕锄误千晌粟8-2南方医科中药化学8-2南方医科中药化学;3、 作用于α-去氧糖的反应 ①Keller-Kiliani(K-K)反应 过程：强心苷 ? 冰醋酸+Fe3+? 浓硫酸 现象： 醋酸层 蓝或蓝绿色（α-去氧糖） 两液间 洋地黄毒苷元，草绿色 羟基洋地黄毒苷元，洋红色 久置后变暗 异羟基洋地黄毒苷元，黄棕色 ; ①Keller-Kiliani(K-K)反应 特点： α-去氧糖的特征反应。此反应要求存在α-去氧糖或能水解出α-去氧糖（对游离的α-去氧糖或α-去氧糖与苷元连接的苷都能呈色） α-去氧糖与葡萄糖或其他羟基糖相连接的双糖、叁糖，因在此条件下较难水解出α-去氧糖，故不呈色。所以反应阴性时，未必不含此糖。 ;② 对二甲氨基苯甲醛反应 —— 灰红色 ③ 占吨氢醇反应—— 显红色 ④ 过碘酸-对硝基苯胺反应 ⑤ 对-硝基苯肼反应 ;8.5 提取分离;Resolution： 1.抑制共存酶水解： 新鲜原料采收后，尽快干燥，最好在50～60℃通风快速烘干或晒干，避潮保存。 70％～80％的乙醇处理原料，抑制酶的活性 加入酶的沉淀剂：一定饱和度的硫酸铵 ;Resolution： 2.共存杂质处理方法： 糅质、酚酸性物质、皂苷、水溶性色素等水溶性杂质 铅盐沉淀法 强心苷可被吸附而损失，吸附量与含醇量有关，增加醇的含量，能降低对强心苷的吸附，但除杂效果下降。 聚酰胺（或氧化铅）吸附法 强心苷也可被吸附而损失，吸附量与含醇量有关。 ;Resolution： 3.除去不同原料中特有的杂质 种子或含脂多的原料——脱脂 ①先用石油醚或溶剂汽油脱脂，再进行提取 ②先用醇或稀醇提取，回收醇，水提液再用石油醚或溶剂汽油萃取 叶等含叶绿素的原料——除去叶绿素、树脂 ①醇提取，浓缩提取液(如:至含乙醇15％～20％)，静置析胶 ②醇提取，加入活性炭（吸附法）;（一）一般提取方法： 提取溶剂： 70％～80％乙醇溶液 注意： 原料含脂类杂质，先用石油醚脱脂 原料含叶绿素，析胶或用活性炭吸附法除去 鞣质等杂质，铅盐沉淀、聚酰胺吸附等法除去 ;（二）一般分离方法： （1）粗分： 除去杂质后的强心苷提取液，如含有醇，可浓缩除去醇，得浓缩水溶液，再用CHCl3和不同比例的CHCl3-MeOH(或EtOH)依次萃取，将强心苷按极性大小划分为亲脂性、弱亲脂性等几个部分，供进一步分离. ;浸精臭集蛹赞蛇孝与行午裴矫赤梗冶练真绳讫惫诽紧像灶谊稻咀箩毋熊责8-2南方医科中药化学8-2南方医科中药化学;（二）一般分离法： （2）精分：;溶剂萃取法和逆流分溶法(DCCC)： 特点： 均是利用强心苷在两相溶剂间的分配系数不同而达到分离。DCCC适用于结构相近的强心苷 例如： 毛花洋地黄总苷中甲、乙、丙的分离;吸附色谱法： 吸附剂：中性氧化铝或硅胶 洗脱剂：苯、苯-氯仿、氯仿、氯仿-甲醇 特点： 一般用于分离亲脂性强心苷（单糖苷或次生苷和苷元） 例如： 黄花夹竹桃果仁中分离黄夹次苷甲、乙等;分配色谱法： 支持剂：硅胶、硅藻土或纤维素 洗脱剂：不同比例的氯仿-甲醇-水、 乙酸乙酯-甲醇-水、 水饱和的丁酮等 特点：分离弱亲脂性强心苷效果较好 ;重结晶： 特点：对含量较高的组分，反复结晶 ;（三）分离提取实例;实例 （1）去乙酰毛花洋地黄苷丙（西地蓝）的提制 来源：玄参科毛花洋地黄的叶 主要成分：毛花洋地黄苷甲、乙和丙（弱亲脂性） 西地兰溶解性： 易溶于MeOH，