真菌感染实验室检测.ppt

* * * 曲霉感染：流行病学 2012年度26株丝状真菌 曲霉22例 毛霉1例 烟曲霉 曲霉 侵袭性曲霉病的诊断 实验室真菌学检查主要以形态学检查方法为基础，镜检、培养及组织病理学检查等形态学检查方法仍是金标准 目前的诊断水平不能满足临床需求 非培养诊断方法如GM 试验、G 试验及PCR技术的联合使用可提高侵袭性曲霉病的早期诊断水平 真菌性角膜炎 镰刀菌和曲霉常见 实验室检查方法 角膜刮片： 涂片：染色、不染色 培养 隐球菌病 可见圆形厚壁孢子，外围有一透光的厚荚膜，荚膜内的菌体可出芽，孢内有一较大的反光颗粒（脂质颗粒，不是孢核），需与白细胞或淋巴细胞相鉴别 隐球菌墨汁染色镜检 肺隐球菌病痰悬浮颗粒墨汁涂片 实验室检查方法 涂片墨汁染色 分离培养 胶乳凝集试验 毛霉菌病 肺毛霉病 患者，女，68岁 因咳嗽，并咯血就诊 胸片见浸润 白细胞计数：7.2×109 肺肿瘤标志物（-） GM（-）G试验（-） 气管镜刷片？ 支气管刷片染色 HE 六胺银 革兰 马尔尼菲青霉病 地方性真菌病是东南亚地区的流行病，中间宿主为竹鼠。播散性常见于HIV患者。 马尔尼菲青霉菌 卡氏肺孢子菌 检查方法： 直接镜检 六胺银染色 诺卡菌病 吸入或有外伤进入体内，可引起肺部和皮下组织感染，也可播散至全身。 总结 目前常用的真菌感染检测方法 1. 微生物学检查 直接涂片镜检和真菌培养 2. 分子生物学检测 -- 真菌DNA的检测 3. 真菌抗原检测 ： GM试验 4. 真菌细胞壁组分检测 ：G试验 5. 胶乳凝集试验----隐球菌 谢谢！ 欢迎讨论　 * * * 真菌感染的实验室诊断 主要内容 侵袭性真菌感染现状 真菌感染检测方法 非培养方法诊断真菌感染 真菌的药敏试验及临床价值讨论 真菌 Fungi 需氧、有真正细胞核、不含叶绿素 寄生或腐生 有性或无性繁殖 真核生物 生态系统的“秃鹫” 据估计自然界中真菌约有150万种 约有300余种可导致人类疾病 创伤、战伤及烧伤 抗生素的滥用 糖尿病、AIDS 病人群的增长 免疫抑制剂 的广泛使用 体内人工植 入物的推广 免疫缺陷、免疫力低下等易感人群不断增多 各种原因导致重要深部真菌感染患者增加 临床希望能鉴别 念珠菌或丝状真菌 白色念珠菌或非白念 曲霉菌或毛霉菌 是否卡氏肺囊虫 不同病原用的药物不同 念珠菌或丝状真菌: 白色念珠菌:氟康唑; 非白念:伏立康唑或卡泊芬净; 丝状真菌:对氟康唑天然耐药 曲霉菌或毛霉菌: 曲霉菌:伊曲康唑,伏立康唑,卡泊芬净,两性霉素-B等 毛霉菌:目前只有两性霉素-B 卡氏肺囊虫: 复方新诺明 美国8124例尸检结果IFI发病率 P0.01 Grool A, et al. Trends in the postmortern epidemlology of invasive fungal infections at a university hospital. [J]. J Infect, 1996, 33(1): 23． 中国3347例尸检结果IFI发病率 北京协和医院对1953-1993年共计3447例尸检进行回顾性调查分析 P0.01 人类最常见的深部真菌病 念珠菌病（监护中心、白血病、烧伤、肿瘤、AIDS、 SARS） 隐球菌病（AIDS、移植、SLE） 曲霉病（白血病、移植、AIDS、SARS ） 接合菌病（白血病、糖尿病、烧伤） 马内菲青霉病（自然疫源） 念珠菌病 念珠菌分离鉴定 无菌标本: 区别污染菌? 非无菌标本: 区别定植菌? 侵袭性念珠菌感染：流行病学 最常见的致病菌 白念珠菌 已发现的其他致病菌 热带念珠菌 光滑念珠菌（球拟酵母） 近平滑念珠菌 高里念珠菌 克柔念珠菌 葡萄牙念珠菌 解脂念珠菌 Pfaller MA，Diekema DJ．Epidemiology of invasive candidiasis：a persistent public health problem E [J]. Clin Microbiol Rev, 2007, 20 (1): 133-163. 吴绍熙，廖万清,等.1986年、1 996年、2006年我国念珠菌属变迁.中国感染与化疗杂志,2009,9:6 美国侵袭性念珠菌感染发病率 Data from the National Hospital Discharge Survey (NHDS), 1996–2003 (/nchs/ ).