β内酰胺类抗生素颜色反应快速鉴别系统(讲义北京修改).ppt

β－内酰胺类抗生素快速鉴别系统 ◆β－内酰胺类抗生素的结构特点和分类 ◆β－内酰胺类抗生素的化学系统鉴别的 总体思路 ◆β－内酰胺类抗生素的化学系统鉴别的 具体方法与步骤 ◆β－内酰胺类抗生素的操作要点及注意 事项 β－内酰胺类抗生素包含的品种较多，剂型几乎覆盖了抗生素类药品所能应用的全部剂型。 结构分类 β-内酰胺类药物按骈合环可分为青霉素（骈合五元氢化噻唑环）、头孢菌素（骈合六元氢化噻嗪环）及碳青霉烯类三类。 采用羟肟酸铁反应可直接快速初步区分大部分β-内酰胺类抗生素与其他药物，且根据颜色的差异快速区分青霉素类与头孢菌素药物． 蓝紫 制 剂 分 类 制 剂 特 点 ★ β－内酰胺类抗生素快 检 系 统 方 法 分 类 按制剂中辅料的多少及种类分为三类： 注射用粉针剂：几乎不含辅料或仅含少量助溶剂，如精氨酸、碳酸钠 片剂、胶囊：辅料成分简单、干扰小 颗粒剂、干混悬剂：辅料含量多、成分复杂、干扰大 H-033 H-033 阿莫西林阿莫西林/克拉维酸钾氨苄西林 颜 色 反 应 注射用粉针剂的羟肟酸铁反应：桔红色、深桔红色或浅桔红色混浊或溶液，照片如下： 其 他 因头孢氨苄与头孢拉定的化学结构十分相近，采用目前建立的化学快检方法无法对二者的各种制剂进行有效鉴别，鉴别上述两个品种时应注意结合其它方法，如近红外鉴别、授权HPLC法鉴别。 头孢拉定 头孢氨苄 头孢羟氨 苄 三氯化铁 反应 头孢拉定 头孢氨苄 头孢羟氨苄 TLC 头孢拉定 头孢氨苄 头孢呋辛酯 盐酸头孢他美酯 头孢泊肟酯 碱性酒石 酸铜反应 头孢呋辛酯 盐酸头孢他美酯 头孢泊肟酯 颗粒剂 干混悬剂 β- 内 酰 胺 类 抗 生 素 三氯化铁 反应 头孢氨苄/甲氧苄啶 头孢拉定 头孢氨苄 头孢羟氨苄 头孢克洛 阿莫西林 阿莫西林/克拉维酸钾 头孢克肟 头孢泊肟酯 头孢地尼 头孢氨苄 /甲氧苄啶 头孢拉定 头孢氨苄 头孢羟氨苄 头孢克洛 阿莫西林 阿莫西林/ 克拉维酸钾 头孢克肟 碱性酒石 酸铜反应 （1→ 5） 头孢氨苄/甲氧苄啶 头孢氨苄 头孢拉定 头孢克洛 阿莫西林 阿莫西林/克拉维酸钾 头孢克肟 深蓝紫色 浅墨绿色 头孢羟氨苄 墨绿色 深红色 深棕色 头孢克洛 阿莫西林 阿莫西林/克拉维酸钾 TLC 头 孢 克 洛 阿 莫 西 林 阿 莫 西 林 克 拉 维 酸 钾 H-034 操作要点及注意事项 颜色反应鉴别 一些品种（制剂）的羟肟酸铁反应和三氯化铁反应，反应后溶液的颜色深浅及溶液状态（澄清、浑浊、沉淀等）的判断受实验人员的主观因素的影响较大。为便于判断，标准正文中采用以“或”连接几种颜色、状态的方法进行叙述，举例如下： 注射用粉针剂的三氯化铁反应：微桔红色或浅桔红色混浊或沉淀，照片如下： 颗粒剂、干混悬剂的三氯化铁反应：桔红色、深桔红色或浅桔红色，照片如下： 一些品种（制剂）的碱性酒石酸铜反应，反应现象是颜色渐变的过程，如“深葡萄紫色变深棕色”、“墨绿色变棕黄色”、“蓝色变墨绿色”、“深葡萄紫色变深墨绿色”等，且变化速度的快慢依品种各异。因此，操作该反应时需仔细观察现象。 样品的溶解性对颜色结果的影响 注射用亚胺培南西司他丁加水溶解时，发现溶解性不好使供试品溶液出现混浊，但不影响反应现象的观察和结果的判断． 辅料对颜色反应结果的影响 由于注射剂辅料较少直接溶解即可，不需过滤；片剂和胶囊剂过滤与否对结果影响不大，本实验仍以取粉末加溶剂溶解，取上清夜直接加入试剂后观察颜色为主；颗粒剂干混悬剂用普通的过滤方法很难过滤，辅料对实验结果会产生一定影响，大部分颗粒剂仍以取粉末加溶剂溶解，取上清夜直接加入试剂后观察颜色，参考快检手册的图片仔细观察颜色 薄 层 色 谱 操作要点及注意事项 头孢克洛 头孢菌素类片剂、胶囊 全部颗粒剂、干混悬剂 H-034号 头孢克洛 青霉素类片剂、胶囊 H-035号 头孢拉定 注射用头孢拉定、注射用头孢曲松钠、注射用头孢他啶、注射用头孢唑肟钠 H-036号 头孢唑啉 大部分粉针剂 H-033号 参比药品 适用的品种和制剂 展开系统 操 作 要 点 选择参比物的依据 0.33~0.42 0.20~0.24 0.64~0.69 0.70~0.72 Rf值 乙酸乙酯－乙醚－二氯甲烷－甲酸（５：４：５：4） 乙酸乙酯－丙酮－冰醋酸－水（５：２：２：０.５） 乙酸乙酯－乙醚－二氯甲烷－甲酸（５：４：５：６） 乙酸乙酯－丙酮－冰醋酸－水（５：２：２：１） 组分配比 头孢克洛 H-034号 头孢克洛 H-