可编辑核酸酶介导的哺乳动物基因敲入技术必威体育精装版进展-中国细胞生物学.PDF

中国细胞生物学学报 Chinese Journal of Cell Biology 2016, 38(1): 72–80 DOI: 10.11844/cjcb.2016.01.0269 综述 可编辑核酸酶介导的哺乳动物基因敲入技术必威体育精装版进展 1 1 2 2 2 1 1* 张敏杰 孙 玲 刘 真 蔡毅君 孙 强 杨宇丰 陈文锋 1 2 ( 福州大学生命科学研究所, 福州 350108; 中国科学院上海生命科学研究院神经科学研究所, 上海 200031) 报 摘要 实验哺乳动物模型是研究基础生物学及人类疾病的重要工具, 对实现转基因操作, 尤 其是基因敲入(knock-in, KI), 具有重大意义。锌指核酸酶(zinc-finger nucleases, ZFN) 、类转录激活 因子效应物核酸酶(transcription activator-like effector nucleases, TALEN)和RNA介导的、基于成簇 的规律间隔的短回文重复序列和Cas9蛋白的DNA核酸内切酶[clustered regulatory interspaced short 学 palindromic repeat (CRISPR)/Cas9-based RNA-guided DNA endonucleases, CRISPR/Cas9]等的出现, 为科研工作者提供了革命性的转基因操作工具。这些可编辑核酸酶通过在靶标序列位置产生双链 断裂缺口(double strand breaks, DSBs), 并在同源修复模板存在的情况下发生同源重组, 进而实现精 学 确的基因敲入。该文主要综述了这些技术的原理及其在哺乳动物KI 中取得的必威体育精装版进展、提高KI效 率以及降低脱靶效应的举措等, 将有助于KI技术在未来转基因实践中的广泛应用。 关键词 基因敲入; 锌指核酸酶; 类转录因子效应物核酸酶; CRISPR/Cas9; 哺乳动物 物 Latest Progress of Gene Knock-in Mediated by Programmable Nucleases in Mammals 1 1 2 2 2 1 1 生 * Zhang Minjie , Sun Ling , Liu Zhen , Cai Yijun , Sun Qiang , Yang Yufeng , Chen Wenfeng 1 2 ( Institute of Life Sciences, Fuzhou University, Fuzhou 350108, China ; Institute of Neuroscience, Shanghai Institutes for Biological