实验八气相色谱法测定藿香正气水中乙醇的含量.PDF

实验八 气相色谱法测定藿香正气水中乙醇的含量 【目的要求】 1. 学习气相色谱仪操作规程及其使用要求。 2. 掌握气相色谱-氢火焰离子化检测器法（GC-FID ）测定含量的原 理及计算方法。 【仪器与材料】 气相色谱仪、微量进样器、无水乙醇、正丙醇、藿香正气水（市售） 【色谱条件】 色谱条件：进样口温度 190℃，检测器220 ℃，恒温 65℃，记录 8 分钟。载气：高纯氮。毛细管色谱柱：AB-FFAP 30m*0.25mm, 0.25um 。 【实验内容】 对照品溶液的制备 精密量取恒温至 20 ℃的无水乙醇和正丙醇各 5ml，加水稀释成100ml，混匀，再精密吸取1ml 加水稀释成100ml，混 匀即得。 供试品溶液的制备 精密量取恒温至 20 ℃的藿香正气水 10ml 和正 丙醇5ml，加水稀释成100ml，混匀，再精密吸取1ml 加水稀释成100ml， 混匀即得。 校正因子的测定 取对照品溶液1μl，连续注样3 次，记录对照品无 水乙醇和内标物质正丙醇的峰面积，按下式计算校正因子： 式中：As为内标物质正丙醇的峰面积；AR 为对照品无水乙醇的峰面积； Cs为内标物质正丙醇的浓度；C 为对照品无水乙醇的浓度 R 取3 次计算的平均值作为结果。要求3 次之间的RSD 值不大于2.0% 。 供试品溶液的测定 取供试品溶液1μl，连续注样3 次，记录供试品 中待测组分乙醇和内标物质正丙醇的峰面积，按下式计算含量： 式中：Ax 为供试品溶液峰面积；Cx 为供试品的浓度。 取3 次计算的平均值作为结果。藿香正气水中乙醇含量应为40～50% 。 【注意事项】 1. 使用气相色谱仪应严格遵守操作规程。 2. 实验室及氢气钢瓶附近应杜绝火源。 3. 实验完毕后，待载气、氢气转子流量计降至零位时，最后关闭钢 瓶上的分压阀门使其放松。 4. 爱护微量进样器，进样时动作应轻捷，防止损坏。 【思考题】 气相色谱法用于定量可采用哪几种方法？ 【附录】 A ．气相色谱法 1、对仪器的一般要求 通常所用载气为氮气；色谱柱为填充柱或毛 细管柱，填充柱的材质为不锈钢或玻璃，载体用直径 0.25~0.18mm 、 0.18~0.15mm 或0.15~0.125mm 经酸洗并硅烷化处理的硅藻土或高分子多 孔小球；常用玻璃或弹性石英毛细管柱的内径为0.20mm 或0.32mm 。进 样口温度应高于柱温30～50℃；进样量一般不超过数微升；柱径越细进 样量应越少。检测器为氢火焰离子化检测器，检测温度一般高于柱温， 并不得低于100℃，以避免水汽凝结，通常为250～350℃。 药典各品种项下规定的条件，除检测器种类、固定液品种及特殊指 1 定的色谱柱材料不得任意改变外，其余如色谱柱内径、长度、载体牌号、 粒度、固定液涂布浓度、载气流速、柱温、进样量、检测器的灵敏度等， 均可适当改变，以适应具体品种并符合系统适用性试验的要求。一般色 谱图约于30 分钟内记录完毕。 2 、系统适用性试验 用规定的对照品对仪器进行试验和调整，分析 测试色谱柱的理论板数、分离度、重复性和拖尾因子，以达到规定的要 求，保证分析的精确性。 （1）色谱柱的理论板数（n ）在选定的条件下，注入各品种项下规 定的供试品溶液或内标物质溶液，记录色谱图，量出供试品主成分或内 标物质峰的保留时间（tR ）和半峰高宽（Wh/2 ），按 n=5.54(tR/Wh/2)2 计算色谱柱的理论板数。如果测得理论板数低于规定的理论板数，应改 变色谱柱的某些条件（如柱长、载体性能、色谱柱充填的优劣等），使理 论板数达到要求。 注意：测得的各项参数可以采用时间或长度计，但必须取相同单位。 （2 ）分离度 要求被测物色谱峰与其他峰或内标峰之间的分离度应 大于1.5 或各品种项下规定的值。分离度（R ）的计算公式如下： 式中 和 为相邻两峰的保留时间，W1Rt2Rt1 及W2 为此相邻两峰的 峰宽，保留时间和峰宽可以采用时间或长度计，但两者必须取相同单位。 （3 ）进样重复性 取对照溶液，连续进