选修三 1.1 DNA重组技术的基本工具 (上课用).ppt

基因工程的产物; 1.基因工程的概念;; 基因工程的概念;普通棉花　　 抗虫棉;设想一;;基因工程培育抗虫棉的简要过程：;解决培育抗虫棉的关键步骤需要哪些工具？;第1节DNA重组技术的基本工具;识别双链DNA 分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。;磷酸二酯键;;G A A T T C; 被限制酶切开的DNA两条单链的切口，带有几个伸出的核苷酸，他们之间正好互补配对，这样的切口叫黏性末端。; 不同的限制酶切割后可以形成不同的黏性末端;; 例.限制酶在DNA的任何部位都能将DNA切开吗？以下是四种不同限制酶切割形成的DNA片段:你是否能用DNA连接酶将它们连接起来？ ;二、 “分子缝合针” ——ＤＮＡ连接酶; 3、类型;3、ＤＮＡ连接酶类型：; 可把黏性末端之间的缝隙“缝合”起来，;DNA连接酶与DNA聚合酶是一回事吗？;A;A;A;A;2、DNA聚合酶的作用是什么？ DNA聚合酶和DNA连接酶是同一回事吗？;;GAATTC;DNA连接酶有连接单链DNA的本领吗？;1. 载体的种类;议一议;1）能够在宿主细胞中复制并稳定地保存。 2）具多个限制酶切点，以便与外源基因连接。 3）具有某些标记基因，便于进行筛选。 4）对受体细胞无害。 5）载体DNA 分子应大小适中。 ;标记基因;质粒; 天然的DNA分子可以直接用做基因工程载体吗？为什么？;小结;课后作业 ;1．在基因工程中用来完成基因的剪接的工具是 （ ） A．限制酶和连接酶 B．限制酶和水解酶 C．限制酶和运载体 D．连接酶和运载体 ;2、下列关于基因工程的叙述，错误的是（ ） A.基因工程的出现使人类有可能按照自己的意愿定向的改造生物，培育出新品种 B.基因工程是细胞水平的生物工程 C.基因工程的产物对人类不一定都是有益的 D.基因工程又叫DNA重组技术;3、关于限制酶的说法正确的是（ ） A.限制性核酸内切酶是一种酶，只识别GAATTC碱基序列 B.EcoRI切割的是G-A之间的氢键 C.限制酶一般不切割自身的DNA分子，只切割外源DNA D.限制酶只存在于原核生物中;4、DNA连接酶的重要功能是（ ） A.DNA复制时母链与子链之间形成氢键 B.黏性末端碱基之间形成氢键 C.将两条DNA片段末端之间的缝隙连接起来 D.将单个核苷酸加到某DNA片段末端，形成磷酸二酯键;5.在基因工程中，切割运载体和含有目的基因的DNA片段，需使用（ ） 同种限制酶 B. 两种限制酶 同种连接酶 D. 两种连接酶 ;6.不属于质粒被选为基因运载体的理由是 A、能复制 （ ） B、有多个限制酶切点 C、具有标记基因 D、它是环状DNA;7．下列四条DNA分子，彼此间具有粘性末端的一组是 （　　） A．①② B．②③ C．③④ D．②④;8. 基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的。在基因操作的基本步骤中，不进行碱基互补配对的步骤是 （ ） A、人工合成目的基因 B、目的基因与运载体结合 C、将目的基因导入受体细胞 D、目的基因的检测和表达;9.限制性内切酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，限制性内切酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—。在质粒上有酶Ⅰ的一个切点，在目的基因的两侧各有一个酶Ⅱ的切点。 （1）请画出质粒被限制酶Ⅰ切割后所形成的黏性末端。 （2）请画出目的基因两侧被限制酶Ⅱ切割后所形成的黏性末端。 （3）在DNA连接???作用下，上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端能否连接？为什么？;1.1944年艾弗里(O.Avery)等进行了肺炎双球菌体外转化实验,证明了DNA是生物的遗传物质,并且证明了DNA可以从一种生物个体转移到另一种生物个体,成为基因工程的先导;2.1953年沃森和克里克建立了双螺旋结构模型,使生物学进入分子水平。;3.1963年尼伦伯格和马太做蛋白质体外合成实验,破译编码氨基酸的遗传密码.;1)基因转移载体的发现 2)工具酶的发现 3)DNA合成和测序技术的发明 ;4) DNA体外重组的实现 ;1973年博耶和科恩使重组DNA转入大肠杆菌中,转录出相应的mRNA,并使外源基因可以在原核细胞中成功表达,至此表明基因工程正式问世.