HPLC常见故障分析及其排除方法.ppt

HPLC 常见故障分析 及其排除方法 于孔宪 2004-3-26 沈阳天美达科学仪器有限公司 024 FAX：024 旨 集三十余年使用与维护仪器之经验 汇各国仪器常见故障之点滴 ------奉献给祖国的栋梁 天津大学-沈阳化工局-省防疫站-省食品所 -日本岛津-香港天美-自立门户 HPLC流程结构有机结合紧密相关 相对检测器本底低 UV与检测条件相呼应 190nm--220nm近紫外区注意事项 样品浓度与检测器灵敏度 PH值对色谱柱影响 机械杂质、有机杂质 脱气--脱气装置质量 有关流动相常见故障现象 泵前输液管有气泡 脱气 清洗溶剂滤头 检查输液管是否破损 过滤膜用错-- 保留时间变化--挥发--吸收 输液泵 进样伐---7725i 进样模式 1 部分充满定量管而不浪费样品 2 完全充满定量管 MBB（Make-Before-Break) 断流前之动作 带（i）后缀意味着有内置式触发开关 不推荐用户长时间最高压力下工作 定量管体积 0.1微升-10毫升 最高压力 35-49MPa 色谱柱 如何选择色谱柱? 1 柱效 塔板数/米 总塔板数 250毫米 70000 17000 200毫米 70000 14000 150毫米 70000 10500 2 柱填料 C18 C8 C6 NH CN …… 3 /china 色谱柱维护 色谱柱安装 保护柱安装 平衡色谱柱 反向柱（C18）用甲醇 乙腈10-20倍 柱体积平衡 250×4.6柱体积约4毫升 注意柱前柱后死体积 连接件 1: SUS 一卡就死 卡过就断 不同柱死体积不同 2:PEEK 承受压力有限 3:SUS-PEEK 优于1 2 色谱柱损坏现象 柱效减低 峰型变矮变宽 保护柱失效 分析柱污染 柱前柱后死体积 分析柱头塌陷 色谱峰出现肩峰 何谓肩峰? 柱连接管断在柱头里 色谱柱受震动 您的色谱柱是否在病态运行 样品前处理--保护色谱柱 液液萃取 液固萃取 固相萃取 上样 纯化 洗脱 洗柱 固相萃取装置--自动化富集 SPE预处理柱 子弹头式 针管式 12孔 24孔式 氮吹仪 --浓缩样品 12孔 24孔式 检测器 氘灯损坏 噪声大 检测池污染 噪声大 检测池有气泡 噪声尖大 接地线 噪声大 压力过大 噪声大 参比池污染 噪声大 检测池漏液 噪声大 您的检测器噪声如何? 消耗品 流动相 国产甲醇7元/瓶 国产乙腈38元/瓶 进口甲醇210元/瓶4L 进口乙腈450元/瓶4L 氘灯 SPD-10AVP 3200元/只/2000小时 SPD-10AVP用国产 1500元/只/2000小时 管接头 SUS-PEEK接头 保护柱 国产550元/套（三柱芯） 分析柱 国产1100元/只 色谱工作站 噪声大 不采集 不积分 爱死机 你的工作站怎样? 您对交流感觉如何? 13 14 15 * * 1 2 流动相 输液泵 7725i 色谱柱 检测器 色谱工作站 在线过滤器 保护柱 溶剂滤头 3 流动相 4 5 输液泵 出口单向伐 入口单向伐 柱 塞 杆 压力波动 压力很低 漏液 压力很低 6 实用 快速 经济 可靠 7 流动相 输液泵 7725i 色谱柱 检测器 色谱工作站 10MPa 9.9MPa 0.5MPa 0.0MPa 压差 0.1 9.4 0.5 MPa 压力从何处产生? 8 9 10 11 12 * *