实验二 细菌的人工培养 最后.ppt

人工培养细菌的意义 在医学中的应用：诊断；细菌鉴定；生物制品。 在工农业生产中的应用：细菌在培养过程产生多种代谢产物，经过加工处理，可制成抗生素、维生素、氨基酸、有机溶剂、酒、酱油、味精等产品。 在基因工程中的应用：制备出胰岛素和干扰素等生物制剂。 问题与讨论 1.培养基按物理性状分为几种？决定相应物理性状的物质是什么？不同物理性状的培养基主要用途如何？ 2.什么是菌落？分离培养时，如何识别琼脂平板上的目的菌，还是污染的杂菌菌落？ 3.液体培养基中细菌的生长状态有哪几种？各举一例说明。 本次实验课结束作业看结果后由组长收齐交上来，值日同学留下 再见！ 实验二 细菌的人工培养 微生物学实验 1.熟悉培养基的成分、类型和作用; 2.掌握细菌平板划线分离法的原理、 步骤及结果; 3.掌握细菌在液体培养基的三种生长 状态; 4.了解细菌的自然界分布. 实验内容和要求 细菌的人工培养 一、培养基 概念: 培养基是用人工方法将多种营养物质按照各类微生物生长的需要而合成的一种混合养料。 任何培养基都应该具备微生物生长所需要六大营养要素： 碳源、氮源、无机盐、能源、生长因子、水 任何培养基一旦配成，必须立即进行灭菌处理 高压蒸汽灭菌 按物理状态不同划分 固体培养基 液体培养基 在液体培养基中加入一定量凝固剂，使其成为固体状态，琼脂含量一般为1.5%-2.0% 琼脂含量一般为0.3%-0.5% 不加任何凝固剂 半固体培养基 固体培养基常用来进行微生物的分离、鉴定、活菌计数及菌种保藏 观察微生物的运动特征、分类鉴定及噬菌体效价滴定 用于增菌，大规模工业生产及在实验室进行微生物的研究 培养基的分类： 固体培养基 半固体培养基 液体培养基 按用途不同划分 基础培养基 鉴别培养基 含有一般微生物生长繁殖所需的基本营养物。比如 肉汤培养基。 选择培养基 利用细菌代谢产物不同而使指示剂显色反应不同的原理，鉴别和鉴定细菌。如麦糠凯琼脂培养基。 营养培养基 在培养基中加入相应的特殊营养物质或化学物质，抑制不需要的微生物的生长，有利于所需微生物的生长。用来将某种或某类微生物从混杂的微生物群体中分离出来。如SS琼脂培养基。 在基础培养基中加入某些特殊营养物质制成的一类营养丰富的培养基。如血琼脂培养基。 特殊培养基 如厌氧培养基。用于厌氧菌的培养。 培养基的分类： 细菌的人工培养 二、细菌的接种技术 分离培养接种法——平板划线法、平行划线法 纯种细菌接种法 ——固体斜面培养基接种法 液体培养基接种法 半固体培养基接种法 细菌分离培养接种法的原理 根据机械分离作用，在无菌培养基中从混杂的标本中分离出所需的单个细菌生长繁殖所形成的菌落。 图4-2　平板划线分离法 1.斜线法 2.曲线法 3.方格法 4.放射法 5.四格法 1、以无菌操作用接种环取待分离纯化的菌液，将菌液点种在平板边缘一处，取出接种环，烧去多余的菌种。 2、将接种环再次通过稍打开皿盖的缝隙（约45度角）伸入平板，在平板边缘空白处接触一下使接种环冷却,然后从接种有菌的部位在平板上自左向右轻轻划线。 3、划线时平板面与接种环面成30-40度角，以手腕力量在平板表面轻巧滑动划线, 线条要平行密集，充分利用平板表面积，注意勿使前后两条线重叠，划线完毕，关上皿盖.灼烧接种环。 斜线(分区)划线分离法 4.用接种环先将培养物涂布于平板1区并作数次划线,再在2、3……区依次划线。 5.每划完一个区域，均将接种环灭菌一次，待冷后再划下一区域 6.每一区域的划线均接触上一区域的接种线1~2次，使接种量逐渐减少，以获得单个菌落。其他操作与上述曲线划线分离法相同。 斜线(分区)划线分离法 操作要领： 无菌操作。 无划破琼脂。 前后两条线密而不重叠。 做好标记，第二天观察结果 平板划线分离法 纯种细菌接种法 液体培养基接种 半固体培养 基穿刺接种 固体斜面培养基接种 图　斜面接种时的无菌操作 (1)接种灭菌 (2)开启棉塞 (3)管口灭菌 (4)挑起菌苔 (5)接种 (6)塞好棉塞 （1）细菌在固体培养基中的生长现象 菌落定义：指单个细菌在平板培养基上生长繁殖，形成单一肉眼可见的细菌集团。菌落特征：大小、形状、边缘、颜色、表面、透明度、湿润度、黏度、溶血性。 菌落类型：S型、R型、M型菌落。 菌苔：指多个菌落融合在一