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分子植物育种，2006年，第4卷，第4期，第559-564页 MolecularPlantBreeding,2006,Vol.4,No.4,559-564 研究报告 ResearchReport 根癌农杆菌介导的花魔芋遗传转化体系的研究 1 2 1 1* 周盈 林拥军 柴鑫莉 孙明 1华中农业大学农业微生物学国家重点实验室,武汉,430070;2华中农业大学作物遗传改良国家重点实验室,武汉,430070 *通讯作者,m98sun@mail.hzau.edu.cn 摘 要 本研究以潮霉素抗性基因为选择标记，建立了根癌农杆菌介导的花魔芋 ( ) Amorphophalluskonjac 的遗传转化体系。同时探讨了魔芋愈伤组织的培养基、筛选剂和筛选时间等因素对转化效率的影响。通过筛 选时间不同的两个转化试验，分别从300个花魔芋愈伤组织中得到了16个和18个具有潮霉素抗性的愈伤 组织，其抗性愈伤率为5.33%和6.00%。获得的抗性愈伤组织进一步在分化培养基上进行分化，其分化效率 分别为31.2%和22.2%。移栽后，分别得到了39株和36株成活植株。PCR检测表明分别有26株和21株再 生花魔芋出现了800bp的特异性扩增带型，其阳性率分别为66.7%和58.3%。随机挑取20个PCR阳性植株 的DNA进行斑点杂交检测，结果表明外源基因已经整合到花魔芋的基因组中。 关键词 花魔芋,根癌农杆菌,遗传转化体系 GeneticTransformationSystem ofAmorphophalluskonjacMediatedby Agrobacteriumtumfaciens 1 2 1 1* ZhouYing LinYongjun ChaiXinli SunMing 1StateKeyLaboratoryofAgriculturalMicrobiology,HuazhongAgriculturalUniversity,Wuhan,430070;2NationalKeyLaboratoryofCropGenetic Improvement,HuazhongAgriculturalUniversity,Wuhan,430070 *Correspondingauthor,m98sun@mail.hzau.edu.cn An -mediatedtransformationsystemhasbeendevelopedfortheproduction Abstract Agrobacteriumtumfaciens oftransgenicplantsof .Theexplantswereinoculatedwithan Amorphophalluskonjac Agrobacteriumtumfaciens strainEHA105carryingtheplasmidpBMB0890containingselectivegenehygromycinphosphotransferase(hpt). Factorsthatinfluence -mediatedtransformationof ,including Agrobacteriumtumfaciens Amorphophalluskonjac culturemedium(Table1),selectionagentsandselectiontimewereinvestigated.16and18resistantcalliwereob- tainedfrom300calliseparately.Thetransformationfrequencywas5.33%and6.00%,repectively.31.2%and 22.2%ofresistantcallicouldgenerateplants.PCRanalysiso