实验动物的抓取和固定基本原则 - 中药与海洋药物实验室.ppt

第八讲 动物实验基本操作技术 主要内容 一、动物实验前的准备 1、动物实验室的选择 （1）根据实验目的选择合适的实验室及饲养室 （2）动物实验室要与实验动物同等级别 （3）饲养室应符合实验动物的生活习性及国家实验动物设施各项标准 2、实验动物的购买 （1）应购买有生产许可证的单位生产繁育的实验动物，并索取实验动物的质量合格证明。 （2）根据实验时间的长短，同时购入适量的饲料和垫料。 （3）如果从外地购买动物，应考虑运输中的各种因素对实验动物的影响，并应查阅运输检疫证明。 （4）购买的动物需要经过3-7d的适应观察。 二、实验动物的抓取和固定 基本原则：保证人员绝对安全，防止动物损伤，禁止粗暴对待实验动物。 小鼠的捉拿与固定 抓取时先用右手抓取鼠尾提起，置于鼠笼或实验台向后拉，在其向前爬行时，用左手拇指和食指抓住小鼠的两耳和颈部皮肤，将鼠体置于左手心中，把后肢拉直，以无名指按住鼠尾，小指按住后腿即可。 小鼠 尾静脉注射时，可用小鼠尾静脉注射架固定，先根据动物大小选择好合适的固定架，并打开鼠筒盖，手提鼠尾巴，让动物头对准鼠筒口并送入筒内，调节鼠筒长短合适后，露出尾巴，固定筒盖即可进行尾静脉注射或尾静脉采血等操作。 大鼠的抓取与固定 大鼠的抓取基本同小鼠，只不过大鼠比小鼠牙尖性猛，抓取时为避免咬伤，可带上帆布手套。若做手术或解剖等，则需事先麻醉或处死，然后用细棉线或橡皮筋缚腿，卧位固定在大鼠固定板上；尾静脉注射时的固定同小鼠（只需将固定架改为大鼠固定盒即可）。 豚鼠 兔的抓取与固定 抓取：实验家兔多数饲养在笼内，所以抓取较为方便，一般以右手抓住兔颈部的毛皮提起，然后左手托其臀部或腹部，让其重量的大部分集中在左手上，这样就避免了抓取过程中的动物损伤。不能采用抓双耳或抓提腹部。 固定：一般将家兔的固定分为盒式、台式和马蹄形三种。盒式固定，适用于兔耳采血、耳血管注射等情况；若做血压测量、呼吸等实验和手术时，则需将兔固定在兔台上，四肢用粗棉绳活结绑住，拉直四肢，将绳绑在兔台四周的固定木块上，头以固定夹固定或用一根粗棉绳挑过兔门齿绑在兔台铁柱上；马蹄形固定多用于腰背部，尤其是颅脑部位的实验。 犬的抓取与固定 未经训练用于急性实验的犬性情凶恶，会咬人，因此进行实验时第一个步骤就是要绑住狗嘴，注意捆绑松紧度要适宜。如实验需要静脉麻醉时，可先使动物麻醉后再移去狗头钳，解去绑嘴带，把动物放在实验台上，然后先固定头部，再固定四肢。 犬 猴的抓取与固定 捉取猴应先用捕猴网将猴罩住，对于体型较小的猴，捉取时应先握紧肘部以上的前臂，并把臂部反扭到背后，同时使它的腿伸直，但应防止臂、腿部骨折。对于体型较大的猴，捉取前应先将其麻醉。 其他实验动物 蟾蜍、蛙类 实验动物的性别鉴定 1、大、小白鼠：离乳仔鼠性别鉴定主要以生殖器与肛门之间的距离长短及肛门与生殖器有无被毛为标志。识别要点是： ① 雄性的生殖器与肛门之间的距离较远，雌鼠较近； ② 雄性的生殖器与肛门之间有毛； ③ 雄性的生殖器突起较雌鼠大； ④ 雌鼠乳头较雄鼠明显。 成熟后，雄性可见阴囊,雌性乳头明显而易于区分。 2、豚鼠的性别鉴定 豚鼠的性别鉴定主要是通过生殖器形态来判断。雌性外生殖器阴蒂突起比较小，用拇指按住阴蒂突起，余指拨开大阴唇的皱褶，可见阴道口呈”V”形（注意发情间期的闭锁现象，即一种除了发情和分娩时外，关闭阴道口的细胞结构）；雄性外生殖器有包皮覆盖的阴茎小隆起，用拇指按住其基部包皮，可见龟头向外突出。 3、兔的性别鉴定 幼兔的性别鉴定主要以尿道开口部与肛门之间的距离及尿道开口部的形状来判别。哺乳期仔兔，雄性尿道开口部与肛门之间的距离较远，为雌性的1.5－2倍，雌性较近。雌性尿道开口扁形，大小与肛门同；雄性圆形，略小于肛门。1月龄仔兔，雄性生殖孔呈圆形，翻出可见呈圆柱体的突起；雌性生殖孔呈Y形，翻出仅见有裂缝，裂缝及于肛门。3月龄以上成年兔，雄性阴囊明显而雌性无阴囊；雄性头大短而圆而雌性头小略呈长形。 二、实验动物编号、标记 1.染色法：大、小鼠。 2.打孔法：兔、豚鼠。 3.剪缺口法：小型猪。 4.挂牌法：犬、猴、猫等大中动物。 5.烙印法：犬、兔（数字号码钳） 1.染色法 常用的涂染化学药品有： 红色：0.5％中性红或品红溶液 黄色：3％～5％苦味酸溶液 编号的原则是：先左后右，从上到下。若动物编号超过10或更大数字时，可使用上述两种不同颜色的溶液，即把一种颜色作为个倍数，另一种颜色作为十位数。 2.打孔或剪缺口法 用动物专用耳孔器在动物耳朵的不同部位打一小孔或打成缺口来表示一定号码的方法。 打孔原则： 左耳代表十位，右耳代表个位 3、标牌法 用金属制的牌号（最好用铝或不锈钢的，它可长期使用不生锈）固定于实验动物的颈部、耳朵或脚上，或将号码按实验分组编号烙在栓动物颈部