土壤中微生物的分离纯化(电子版实验报告).doc

微生物实验报告 土壤中微生物的分离与纯化 指导教师：李海花 周四晚第四组 实验成员: 杜玉琪 180112010009 董天涵 180112010008 蒋怡菲 180112010018 逄颖 180112010035 【摘要】利用分离纯化微生物的基本操作技术对土壤中的微生物进行分离和纯化，通过观察微生物的菌落形态特征判断菌的类型并通过平板划线进行分离纯化 【关键词】土壤 、微生物、菌落观察、分离纯化 1.实验目的 （1）通过对几种培养基的配制，掌握配制培养基的一般方法和步骤。 （2）掌握倒平板的方法、接种和无菌操作技术。 （3）初步观察来自土壤中的几类微生物的菌落形态特征，并能判断菌的类型。 （4）学习平板菌落计数的基本原理和方法，并掌握其基本技能。 2.实验原理 （1）培养基的配制与灭菌 培养基是人工配制的适合微生物生长繁殖或积累代谢产物的营养基质，用以培养、分离、鉴别、保存各种微生物或积累代谢产物。一般的培养基应包含适合微生物生长的6大营养素即水分、碳源、氮源、能源、无机盐和生长因子。不同微生物对pH要求不一样，霉菌和酵母菌的培养基的pH一般是偏酸的，而细菌和放线菌培养基的pH一般为中性或微碱性。所以配制培养基时还要根据不同微生物的要求将培养基的pH调到合适的范围。已配制好的培养基必须立即灭菌，如来不及灭菌，应暂存冰箱，以防止其中微生物生长繁殖而消耗养分和改变培养基酸碱度所带来不利影响。 （2）微生物的培养及鉴定 接种：将微生物的培养物或含有微生物的样品移植到培养基上的操作技术称之为接种。接种是微生物实验及科学研究中的一项最基本的操作技术。 接种的关键是要严格的进行无菌操作。 鉴定：常见与常用的微生物中,根据它们的主要形态可分为细菌、放线菌、酵母菌和霉菌四大类。细菌菌落光滑，易于基质脱离；放线菌菌落质地致密菌落较小泛延伸；酵母菌菌落较细菌菌落大而厚；霉菌形成的菌落较稀松，多成绒毛状，絮状。 器材：培养皿、载玻片、 量筒、滴管、吸水纸、烧杯、三角瓶、、玻璃棒、接种环、镊子、 恒温培养箱、高温灭菌锅、天平、滤纸、pH试纸等试剂：配制牛肉膏蛋白胨培养基的原料（牛肉膏、NaCl、琼脂、蛋白胨）、 配置I号培养基的原料（ 可溶性淀粉，KNO3，K2HPO4，MgSO4· 7H2O，NaCl，FeSO4· 7H2O，琼脂 ，pH=7.4-） 硝酸钠磷酸氢二钾硫酸镁氯化钾硫酸亚铁蔗糖琼脂蒸馏水K2HPO4，MgSO4· 7H2O，NaCl，SO4· 2H2O， ，pH=7.-7.2） 培养基的配方： 可溶性淀粉 ···贩贩贩贩贩贩贩贩贩贩贩贩贩贩贩贩贩贩?形态特征判断菌的类型并通过平板划线进20.0 g KNO3贩贩贩贩贩贩贩贩贩贩贩贩贩贩贩贩贩贩贩贩贩贩 贩贩贩贩贩1.0 g K2HPO4 贩贩贩贩贩贩贩贩贩贩贩贩贩贩贩贩贩贩贩贩贩 0.5 g MgSO4? 7H2O贩贩贩贩贩贩贩贩贩贩贩贩贩贩贩贩贩贩贩? 0.5 g NaCl 贩贩贩贩贩贩贩贩贩贩贩贩贩贩贩贩贩贩贩贩贩贩 0.5 g FeSO4? 7H2O·······································0.01 g 琼脂 ·············································20 g 自来水 ········································1000 mL