atp生物荧光肿瘤体外药敏检测技术(atp-tca)的建立及其临床应用研究.ppt

ATP生物荧光肿瘤体外药敏检测技术(ATP-TCA)的建立及其 临床应用研究 答辩提纲 第一部分：ATP生物荧光肿瘤体外药敏检测技术概述 第二部分：ATP生物荧光肿瘤体外药敏检测技术及质量 标准的建立 第三部分：ATP-TCA技术的临床应用研究 第一部分 研究背景 化学治疗是肿瘤的三大治疗手段之一。近30年来，虽然某些恶性肿瘤的化学治疗有明显改善，但多数肿瘤，特别是实体瘤疗效仍不理想。这与肿瘤存在个体差异性，以及多重耐药性等因素有关。 因此如何选择有效药物，进行有的放矢的治疗早已成为化疗界所关注的问题。 2. ATP生物荧光药敏检测技术的优点: 3. ATP-TCA技术原理： 第二部分 ATP-TCA药敏检测技术及质量标准的建立 ATP-TCA技术的核心试剂 1. 荧光酶试剂 热稳定性和发光效率均好的重组酶试剂保证检测的敏感性和可 靠性，满足临床实际工作的需要 2. 培养基 肿瘤细胞选择性培养基支持肿瘤细胞生长增殖，促进正常细胞 死亡，从而保证药敏检测的肿瘤细胞特异性 重组荧光酶制剂稳定性研究 质量标准 ATP-TCA药敏检测的临床应用 一例经多重化疗复发的睾丸癌病人药敏检测结果 治疗效果 2.健择与表阿霉素的联合方案 3. 化疗药物新适应症研究 讨论 研究总结 发表论文 致谢 正常卵巢上皮细胞及成纤维细胞 培养结果 正常上皮细胞培养抑制效果图 成纤维细胞培养抑制效果图 培养前后细胞组成变化 培养前细胞组成 6天培养后细胞组成 淋巴 上皮 成纤维 肿瘤 淋巴 上皮 成纤维 肿瘤 细胞 细胞 细胞 细胞 细胞 细胞 细胞 细胞 40-50% 10-25% 5-10% 10-20% 1% 10% 10% 75% 选择性培养基的研究结果表明该培养基具有良好的选择性，适合肿瘤体外药敏检测的需要 1、培养基对肿瘤细胞生长支持程度 以MCF-7细胞系作为标准细胞系，按2000个细胞/孔接种浓度接种至96孔培养板中，培养七天后，要求测定的RLU值400000。 2、ATP标准曲线 将ATP标准品配成250ng/ml，倍比(3×)稀释7次，做出ATP浓度与RLU（扣除本底吸收值）的标准曲线，要求：r0.995，最小ATP浓度（0.11ng/ml）的RLU400。 3、精密度 选MCF-7细胞系低、中、高（500、10000、40000个）数目的细胞，分别测定十组RLU值，要求： CV10% 4、敏感度 50个MCF-7细胞440RLU，同时本底值200 RLU。 第三部分 ATP-TCA体外药敏检测技术的临床应用研究 ATP-TCA 药物测试方式 评价标准 强敏感(SS)：IC5025%及IC90100%PPC 中度敏感(IS)：IC5025%及IC90100%PPC 轻度敏感(MS)：IC5025%及IC90100%PPC 耐药(R)：IC5025%及IC90100%PPC IC90:抑制90%肿瘤细胞生长的血浆峰值浓度百分比 IC50:抑制半数肿瘤细胞生长的血浆峰值浓度百分比 PPC:一定临床用药剂量对应的血浆峰值浓度 临床相关性研究病人资料 ? 表1：卵巢癌体外药敏检测与临床疗效的比较 临床相关性研究初步结果 例数 体外检测 体外检测 敏感 (SS+IS) 耐药(WS+R) 共计 体内敏感（CR+PR） 体内耐药（SD+PD） 18 2 20 1 11 12 共计