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《微生物的实验室培养》课件 (新人教版选修1)
碳源:如CO2和糖类、脂肪酸等有机物,构成微生物的结构物质和分泌物,自养微生物需无机碳,异氧微生物需有机碳还能提供能量。 氮源:如N2、氨盐、硝酸盐和牛肉膏、蛋白胨等,主要用来合成蛋白质、核酸及含氮代谢物等,无机氮源可为硝化细菌提供能量。 含有C、H、O、N的化合物既可以作为碳源,又可以作为氮源,如氨基酸等。 二. 无菌技术 思考: 1. 什么是无菌技术?包括哪些方面? 2. 无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外,还有什么目的?(P15旁栏思考) 3. 消毒和灭菌有何不同? 4. 常用的消毒和灭菌方法有哪些? 三. 实验操作---大肠杆菌的纯化培养 (一)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 计算-称量-溶化-灭菌-倒平板 (二)纯化大肠杆菌 最常用的接种方法有: 平板划线法和稀释涂布平板法 结果分析与评价 课题延伸 选择培养基 3. 常用的消毒方法: 煮沸消毒法,巴氏消毒法,紫外线或化学药剂消毒法 常用的灭菌方法: 灼烧灭菌 干热灭菌 高压蒸汽灭菌 :100kPa 121℃ 15-30min 判断下列各项是否需要消毒或灭菌。如需要,选择合适方法。 (1)豆浆 (2)游泳池 (3)超净工作台 (4)玻棒、试管、吸管、锥形瓶 (5)培养细菌用的培养皿 (6)无菌水 (7)牛肉膏蛋白胨培养基 (8)接种环、接种针(9)实验操作者的双手 牛奶 接种室、接种箱或超净工作台 接种工具,接种环、接种针或其他金属用具 玻璃器皿(吸管、培养皿) (冷却至50℃) 涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求,想一想,第2步应如何进行无菌操作? 应从操作的各个细节保证“无菌”。例如,酒精灯与培养皿的距离要合适、吸管头不要接触任何其他物体、吸管要在酒精灯火焰周围等等。 菌种的保存 1、临时保藏法: 对象: 温度: 缺点: 2、甘油管藏法: 对象: 温度: (P20) 频繁使用的菌种 4℃(冰箱) 容易被污染或 产生变异 长期保存的菌种 -20℃(冷冻箱) 接种环 接种针 倒平板 讨论1,2 讨论3,4 * 是一切肉眼看不见或看不清楚的微小生物的总称。 一、微生物 微生物 病毒 细菌 放线菌 真菌 原生动物 是一切肉眼看不见或看不清楚的微小生物的总称。 一、微生物 ?1.分类 特点:小 简 低 病毒的结构 ?2.病毒 病 毒 SARS冠状病毒、 禽流感病毒 朊病毒(蛋白质病毒) 病毒的增殖 细菌的外形与大小 ?3.细菌 A. 球菌 B. 杆菌 C. 弧菌 常见的细菌三种典型形态 A B C 细菌的结构 芽孢:细菌形成的椭圆形的休眠体 芽孢的壁很厚,对干旱、低温、高温等恶劣的环境有很强的抵抗力。 芽孢又小又轻,可以随风飘散。 当环境适宜(如温度、水分适宜)的时候,芽孢又可以萌发,形成一个细菌。 异养菌: 腐生菌 寄生菌 大部分病原菌 细菌的营养类型 根据细菌所利用的能源和碳源的不同,将细菌分为两大营养类型。 自养菌: 光能自养型:光合细菌 化能自养型:硝化细菌,铁细菌,硫细菌 菌 落 单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时,就会形成一个肉眼可见的,具有一定形态结构的子细胞群体,叫做菌落。 菌落是鉴定菌种的重要依据。 ?4.放线菌 ⑴结构: 单细胞原核生物 分支状的菌丝(基内菌丝、气生菌丝) (2)繁殖 孢子丝| 孢子 链霉素、土霉素、四环素、 氯霉素、红霉素、庆大霉素 微生物中发现了几千种抗生素,其中2/3是由放线菌产生的 ⑶应用: ?5.真菌 酵母菌 酵母菌和霉菌 青霉 生 殖 腐生生活 孢子生殖 微生物的实验室培养条件: (1)合适的营养和环境条件 (2)确保其他微生物无法混入 一. 培养基 1. 概念: 按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质。 固体培养基:菌落 液体培养基: 表面生长 均匀混浊生长 沉淀生长 半固体培养基: 2. 种类: (按物理形态分) 液体培养基 增菌、工业生产 固体培养基 半固体培养基 应用微生物纯化(分离)、鉴定、计数和 菌种保存等方面 按照培养基用途分 选择性培养基 鉴别培养基 按照培养基的成分来分 合成培养基、天然培养基、半合成培养基 3. 成分: 思考: 各种培养基的具体配方不同,但一般都包括哪些成分? 水、无机盐、碳源、氮源、(生长因子) +满足微生物对pH、特殊营养物质、氧气的要求 C C 无菌技术:泛指培养微生物操作中,
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