分析化学仪器分析课件液相色谱法.ppt

第十三章高效液相色谱法 一、高效液相色谱仪 HPLC 二、高效液相色谱法的特点 feature of HPLC 三、流程及主要部件 general process and main assembly of HPLC 高效液相色谱与经典液相色谱的比较 高效液相色谱与气相色谱的比较 一、液相色谱仪器 high performance liquid chromatograph 液相色谱仪（2） 液相色谱仪（3） 液相色谱仪（4） 二、高效液相色谱法的特点 feature of HPLC 三、流程及主要部件 process and main assembly of HPLC 2.主要部件 (2)梯度淋洗装置 (3) 进样装置 7725 (4) 高效分离柱 紫外检测器 荧光检测器 二极管阵列检测器 示差折光指数检测器 质谱检测器 激光诱导荧光检测器 (5) 液相色谱检测器 b. 光电二极管阵列检测器 光电二极管阵列检测器 c. 示差折光检测器（differential refractive index detector） 示差折光检测器 d. 荧光检测器（fluorescence detector） 第十三章高效液相色谱分析法 一、液-固吸附色谱 liquid-solid adsorption chromatograph 二、液-液分配色谱 liquid- liquid partition chromatograph 三、离子交换色谱 ion-exchange chromatograph 四、离子色谱 ion chromatograph 五、离子对色谱 ion-pair chromatograph 六、排阻色谱 size- exclusion chromatograph 七、亲和色谱(AC) Affinity chromatograph 一、 液-固吸附色谱liquid-solid adsorption chromatography 二、 液-液分配色谱liquid- liquid partition chromatography 三、 离子交换色谱ion-exchange chromatography 四、 离子色谱ion chromatography 五、 离子对色谱ion pair chromatography 六、 排阻色谱色谱size- exclusion chromatography 七、 亲和色谱(AC) Affinity chromatograph 第十三章液相色谱分析法 一、液相色谱固定相 stationary phase of HPLC 二、液相色谱流动相 mobile phase of HPLC 一、液相色谱固定相 stationary phases of LC （3）化学键合固定相 化学键合固定相的特点 2.液-固吸附分离固定相 3.离子交换色谱分离固定相 4. 空间排阻分离固定相 二、液相色谱的流动相 mobile phases of LC 2. 流动相类别 3. 流动相选择 4. 选择流动相时应注意的几个问题 采用 “HPLC” 级溶剂 避免使用会引起柱效损失或保留特性变化的溶剂 对试样有适宜的溶解度 溶剂粘度要小 与检测器相匹配 过滤：0.45um或更小孔径滤膜 目的：除去溶剂中的微小颗粒，避免堵塞色谱柱，尤其是使用无机盐配制的缓冲液。 脱气：除去流动相中溶解或因混合而产生的气泡 气泡对测定的影响： 1）泵中气泡使液流波动，改变保留时间和峰面积 2）柱中气泡使流动相绕流，峰变形 3）检测器中的气泡产生基线波动 无在线脱气应注意： 1）每天脱气 2）如使用氦脱气，对混合溶剂脱气时间不能过长 第十三章液相色谱分析法 一、影响分离的因素 factors influenced separation 二、分离类型的选择 choice of separation types 三、液相色谱的应用 application of HPLC 四、液相制备色谱 preparative liquid chromatography 一、影响分离的因素 factors influenced separation 2.流速 二、分离类型选择 choice of separation types 三、 HPLC的应用 application of HPLC 2. 稠环芳烃的分析 四、制备型液相色谱 preparative liquid chromatography 2. 液相制备色谱的方法 3. 制备型液相色谱 第十三章液相色谱分析法 一、离子色谱法原理 prin