常用培养基制备 灭菌 与 消毒.ppt

实验三 常用培养基的制备、灭菌与消毒 实验目的：1.了解培养基的配制原理 2.掌握配制培养基的一般方法和步骤 培养基是人工配制的，适合微生物生长繁殖或产生代谢产物的营养基质 原则：目的明确 ;营养协调;控制PH、渗透压等条件;经济节约 方法：查阅文献;精心设计;试验比较 步骤：称量、熔化、调PH、过滤、分装、 加塞、包扎、灭菌、冷却、无菌检查 牛肉膏蛋白胨培养基 牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基。其配方如下： 牛肉膏3g，蛋白胨10g，Nacl5g，琼脂15～20g，水1000mL，PH7.0～7.2(后调) 高氏1号培养基 高氏1号培养基是用于分离和培养放线菌的合成培养基。其配方如下： 可溶性淀粉20g，KNO3 1g，NaCl 0.5g，K2HPO4·3H2O 0.5g，MgSO4·7H2O 0.5g，FeSO4·7H2O 0.01g，琼脂15～20g，水1000mL，pH7.4～7.6。 查氏合成培养基 查氏合成培养基是用来分类和培养霉菌的培养基,其配方如下： NaNO3 3g,K2HPO4 1g, KCl 0.5g, MgSO4.7H2O 0.5g,FeSO4 0.01g,蔗糖 30g, H2O 1000ml,pH自然 麦芽汁培养基 用来培养酵母菌,干麦芽粉加4倍水,在50-60℃保温糖化3-4小时，用碘液试验检查至糖化完全为止,调整糖液浓度,煮沸后，过滤，调pH为6.0。 在使用高压蒸气灭菌锅灭菌时，灭菌锅内冷空气的排除是否完全极为重要，因为空气的膨胀压大于水蒸气的膨胀压，所以，当水蒸气中含有空气时，在同一压力下，含空气蒸气的温度低于饱和蒸气的温度。灭菌锅内留有不同分量空气时，压力与温度的关系见表2 观察菌落形态并记录 序号 来源 大小 形状 边缘 颜色 表面 代谢物 种类 实验五：放线菌及霉菌形态观察 目的要求 1.了解放线菌、霉菌的形态观察的原理。 2.学习并掌握观察放线菌、霉菌形态的操作方法。 3.初步了解放线菌、霉菌的形态特征。 放线菌生长到一定阶段，大部分气生菌丝分化成孢子丝，通过横割分列的方式产生成串的分生孢子。孢子丝形态多样，有直、弯曲、钩状、螺旋状、轮生等多种形态。孢子也有球形、椭圆形、杆状和瓜子状等等。它们的形态构造都是放线菌分类鉴定的重要依据。 放线菌的菌落早期绒状同细菌菌落月牙状相似，后期形成孢子菌落呈粉状、干燥，有各种颜色呈同心圆放射状。 霉菌 ( molds) 是丝状真菌的总称,即“发霉的真菌”。通常指菌丝体比较发达而又不产生大型子实体的真菌。常在潮湿的气候下大量生长繁殖。 形态特征（ Morphological characteristics ） 属异养型真核生物，具有丝状或管状结构，单个分支称为菌丝。菌丝形成的网络状结构称为菌丝体。 营养菌丝（vegetative mycelium）：汲取营养 气生菌丝（aerial mycelium） 繁殖菌丝:孢子丝，进行繁殖。 分类（classification） 有隔菌丝：有隔菌丝中有横隔膜将菌丝分隔成多个细胞，在菌丝生长过程中细胞核的分裂伴随着细胞的分裂，每个细胞含有一至多个细胞核。横隔膜可以使相邻细胞之间的物质相互沟通。如曲霉和青霉。 无隔菌丝：菌丝中无横膈膜，整个细胞是一个单细胞，菌丝内有许多核，在生长过程中只有核的分裂和原生质体质量的增加，没有细胞数目的增多。如毛霉和根霉。 繁殖方式 无性繁殖： 芽生孢子 节孢子 孢囊孢子 后垣孢子 分生孢子 有性繁殖： 卵孢子 接合孢子 子囊孢子 几种常见霉菌 根霉 根霉的形态结构 曲霉的形态结构 左侧分生孢子梗具有一层小梗；右侧分生孢子梗具 有二层小梗 青霉的形态结构 A单轮型 B非对称型 C对称二轮型 实验内容 人们设计了各种培养和观察方法，这些方法的主要目的是为了尽可能保持放线菌和霉菌自然生长状态下的形态特征。本实验采用插片法。 插片法:?倒平板→插片→接种→培养→镜检→记录绘图 压印法:?倒平板→划线接种→挑取菌落→加盖玻片→镜检→记录绘图 埋片法:?倒琼脂→切槽→接种→培养→镜检→记录绘图 倒平板 将培养基熔化后，倒10-12毫升左右于灭菌培养皿内，